病料采集流程的教学课件.pptVIP

一、用途 采集的病料常用于细菌分离、涂片检查、抗体检测、病毒分离、病理切片、免疫组化、PCR鉴定、试纸快速诊断等。 通常在出现紧急疫情情况下采集。 二、病料采集注意事项 1. 适时采样。用于病源原分离的样品应在发病初期采集或者有典型症状时采集，急性死亡的动物要立即采集病料。 2. 合理采样。在不知道是何种疫病时采样要全面，包括心、肝、脾、肺、肾、脑等组织器官，还要采集血液、血清、粪便和分泌液等，方便诊断。 3.适量采样。通常在诊断过程中一只鸡的样本是不够的，经常在采集时会做到10只鸡以上，如果是血清学检测采样量通常要大于24份。单个样本量要足够，以便在复检时还有足够的样本。 4. 无菌采样。所用与采样的器械需要经过消毒处理，每个样品单独存放在一个包装内。采样除要防止样品污染更重要的是要防止采样人员感染，因此采样人员必须佩戴乳胶手套和口罩。 5. 及时送样。储备固定液固定的组织和骨组织外，其他样本采集好后均需要进行冷处理。在一天内能送到检测中心的放在4℃，在一天内不能运到的样品最好在-20℃做冰冻处理，然后冷链运输。 6. 每次采样送检。填写《送样信息表》，须注明场子、送检人、被检鸡群日龄，日期，检测项目、检测目的。 7. 送样时间。避免周六周日、节假日、培训日，提前和动保中心人员电话联系确定。 8. 让司机或班车捎样，必须电话跟踪，确定送至目的地。 三、采集步骤 1 肿瘤病料采集要点：需要用固定液固定，用于马立克、白血病、网状内皮切片检测。 1.1 尽量采集活鸡病料，不要采死鸡病料。 1.2 采病料前放血一定要充分。 1.3 病鸡病变组织要明显,要有两个以上组织或器官有肿瘤病变。 1.4 组织块儿大小要求1cm×1cm×1cm或1.5cm×1.5cm×1.5cm, 组织块儿太大固定效果不好。 1.5 采集正常组织和肿瘤组织交界处的组织。 1.6 每瓶固定液只能盛一只鸡的病料。 1.7 固定液浓度要求10%福尔马林（即10毫升40%甲醛+90毫升水）。 1.8 固定液最好盛在干净矿泉水瓶中,组织与固定液比例为1:20以上。 1.9 采集脾脏时一定要剪开筋膜;腺胃不要环切,要顺腺胃长轴竖切。 2 鸡只送样要求： 2.1 活鸡选择有明显症状鸡只，如呼吸道、伸颈、发蔫、挣扎、神经等。 2.2 死鸡选择新鲜刚死亡鸡只，并放于阴凉处。 2.3 使用纸箱子，将鸡只放于纸箱，并用胶带缠好，并用剪刀扎上透气孔。 2.4 不可将鸡放于汽车高温地方，如发动机旁。 3 组织和实质器官采样要求：用于病毒或细菌分离 3.1 采取刚死亡鸡只或刚杀死鸡只病料。 3.2 分离病毒采取脾脏、肺脏、气管、输卵管、脑部、肾脏等组织。 3.3 分离细菌以采取肝脏为主。 3.4病料的采集必须采用无菌操作。剖开腹腔后，注意肠管的完整。更换无菌的器械，直接将目标病变器官摘下放到无菌的包装袋中封好，每只鸡一个口袋。 3.5将病料袋标明时间、场名、栋舍、日龄。 3.6分离病毒病样冷冻保存. 3.7分离细菌病样尽量冷藏保存，冷冻会导致细菌细胞破裂死亡。 细菌病采集部位 病毒病采集部位 4、血清检测送样：用于检测抗体、凝集试验、琼脂扩散试验、Elisa。 4.1血清析出后将血清放于输液管内并封好两端，放至保温盒冰袋内，送动保中心。 4.2如果因时间紧急，可送全血，将注射器内血液凝固后，用胶带缠好，放置冰袋即可送检。 5、液体病料的采集 胆汁、脓肿液、渗出物等液体病料，使用灭菌吸管或注射器，经烫烙部位吸取病变组织的液体，将病料注入灭菌的试管中，塞好棉塞送检。 6、肠道及内容物的采集方法 6.1 肠道：选择病变明显部位的肠道，将内容物弃掉，用灭菌生理盐水冲洗干净，然后将病料放入盛有灭菌的30%甘油盐水缓冲液中送检。 6.2 亦可将肠管切开，用灭菌生理盐水冲洗干净，然后用烧红的手术刀片烫烙粘膜表面，将接种针插入粘膜层，取少量病料接种于培养基上。 6.3 肠内容：用烧红的手术刀片烫烙肠道浆膜层，将接种针插入肠道内，吸取少量肠内容，放入试管中或将带有肠内容的肠道两端扎紧，去掉其它部分送检。 7、皮肤及羽毛的采集 7.1 皮肤要选病变明显部分的边缘，采取少许放入灭菌的试管中送检； 7.2 羽毛也要选病变明显部分，用灭菌的刀片刮取羽毛及根部的皮屑少许，放入灭菌的试管中送检； 7.3 孵化室的绒毛：用灭菌镊子采取出雏机出风口的绒毛3-5克，放入灭菌的试管中送检。 8、泄殖腔、气管棉拭子采样：检测细菌、病毒 取无菌棉签，插入鸡喉头内或泄殖腔转动3圈，取出，插入含无菌缓冲液离心管内，剪去露出部分，盖紧瓶盖，作好标记。 9、全血采样：适合细菌、血液寄生虫感染感染，进行血涂片检测，用灭菌注射器自鸡的心脏或翅静脉采血1-2毫升，注入灭菌试管中。（一般在血液中加入少量的