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466 马腾博 等/灰色链霉菌胰蛋白酶在变铅青链霉菌中的异源表达及酶学性质分析
生 物 工 程 学 报
Chinese Journal of Biotechnology April 25, 2013, 29(4): 466−479
/cjbcn ©2013 Chin J Biotech, All rights reserved
工业生物技术
灰色链霉菌胰蛋白酶在变铅青链霉菌中的异源表达
及酶学性质分析
1,2 1,2 1,2 1,2 3,4 1,4
马腾博 ，令桢民 ，康振 ，李江华 ，堵国成 ，陈坚
1 江南大学 工业生物技术教育部重点实验室，江苏 无锡 214122
2 江南大学生物工程学院，江苏 无锡 214122
3 江南大学 糖化学与生物技术教育部重点实验室，江苏 无锡 214122
4 江南大学 粮食发酵工艺与技术国家工程实验室，江苏 无锡 214122
马腾博, 令桢民, 康振, 等. 灰色链霉菌胰蛋白酶在变铅青链霉菌中的异源表达及酶学性质分析. 生物工程学报, 2013,
29(4): 466−479.
Ma TB, Ling ZM, Kang Z, et al. Heterologous expression and enzymatic analysis of Streptomyces griseus trypsin in
Streptomyces lividans . Chin J Biotech, 2013, 29(4): 466−479.
摘 要: 胰蛋白酶作为一种重要的丝氨酸蛋白酶被广泛应用于食品、医药和皮革等工业领域。本文成功实现
了灰色链霉菌来源的胰蛋白编码基因在变铅青链霉菌中的高效活性表达，并对其酶学性质进行分析比较。以灰
色链霉菌ATCC10137 基因组为模板，获得胰蛋白酶编码基因sprT 并克隆至表达质粒pIJ86 ，成功构建了重组
链霉菌工程菌TK24/pIJ86-sprT 。以R2YE 和SELF 为发酵培养基，最高酶活分别达9.21 U/mL 和8.61 U/mL。
酶学性质分析表明，和牛胰蛋白酶 (BT) 相比，重组链霉菌胰蛋白酶 (rSGT) 的耐酸能力强，具有较广的pH ；
且 rSGT 对酰胺键具有更高的特异性；此外，Zn2+和有机溶剂分别对 rSGT 的酯酶活力和酰胺酶活力具有促进
作用；本研究结果为rSGT 的性质改造以及工业应用提供了依据。
关键词: 灰色链霉菌，变铅青链霉菌，胰蛋白酶，酶学性质，发酵培养基
Received: October 8, 2012; Accepted: December 3, 2012
Supported by: National High Technology Research and Development Program of China (863 Program) (No. 2011AA100905) ，Program for
Changjiang Scholars and Innovative Research Team in University (No. IRT1135), Priority Academic Program Development of Jiangsu Higher
Education Institutions, Independent Innovation Program of Jiangnan University (No. JUSRP111A23).
Corresponding author: Zhen Kang. T
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