生物化学经 典实验——糖的定量测定课程设计.pptVIP

; 3,5-二硝基水杨酸与还原糖共热后被还原成棕红色的氨基化合物： 在一定范围内，棕红色物质颜色的深浅程度与还原糖的量成正比。因此，我们可以利用比色法测定样品中还原糖以及总糖的含量。 该法是半微量定糖法，操作简便、快速，杂质干扰较少。; 三、实验操作 1、样品总糖的水解及提取 准确称取山芋粉1克，放入大试管中，加入10ml 6N HCl和15ml蒸馏水，混匀。在沸水浴加热30min后，用KI-I2溶液检查水解程度。 完全水解后, 冷却并加入酚酞试剂一滴, 以10% NaOH中和至溶液呈微红色, 先用双层纱布过滤, 再用滤纸过滤并定容至100ml。精确吸取上述溶液10ml放入100ml容量瓶、稀释至刻度, 备用。;2、制作葡萄糖标准曲线;测定样品中含糖量时各试剂的用量;将各管混匀后, 按制作标准曲线时同样的操作测定各管的光密度, 在标准曲线上查出相应的糖含量, 按下述公式计算出山芋粉总糖百分含量。 ;1.实验过程中所有的试管要干净, 加入各种试剂量要准确。 2.试剂不可倒出试剂瓶，用干净的移液管吸取，用后盖好瓶塞，防回原处。 3.分光光度计使用：溶液不要倒太多; 毛边不要对着透光处; 用后用自来水冲洗干净, 防回原处。 4.移液管使用：有色看外边缘, 无色看中间凹处。 5.实验室中所有的仪器上面不能放置烧杯、试管、试剂瓶等，以防试剂污染仪器。