课件：氨基糖苷类抗生素的发展和结构特征PPT课件.pptVIP

第四节 应用核糖体工程技术进行微生物菌种选育 应用核糖体工程技术进行微生物菌种选育 抗生素产生菌对自身产物产生抗性的机制与一般病原菌产生抗性的机制一样，一个重要的原因是由于其作用靶位核糖体或核蛋白发生变异所致. 抗生素产生菌 耐药基因 耐药特性 RNA甲基化部位 被甲基化的残基 远青链霉菌 tsr 硫链丝菌素 23S;1067 Am 红霉素链霉菌 ermE MLS 23S;2058 m26A 弗氏链霉菌 tlrA(ermSF) MLS 23S;2058 m26A ? clr Lincosamides 23S;2058 m6A 变青链霉菌 lrm Lincosamides 23S;2058 m6A 刺孢小单孢 kgmA 卡那霉素+庆大霉素 16S;1405 m7G S.tenjinariensis kamA 卡那霉素+阿普拉霉素 16S;1408 m1A 黑暗链霉菌 kgmB+kamB 氨基糖苷类抗生素 16S;1405+1408 m7G+ m1A 卡那霉素链霉菌 kan 卡那霉素+庆大霉素 16S;1405 m7G 一些 抗生 素产 生菌 的rRNA 被修 饰 （甲基化） 而造 成对 自身 产物 的耐 药性 药物 MIC (μg/ml) 为得到突变株所用药物的浓度 所选耐药菌的数目 产量提高的突变株的数目 （相对于亲株提高的倍数） 5倍 10倍 氯霉素 30 60 120 0 0 红霉素 10 30 160 1 0 林可霉素 20 60 160 0 0 大观霉素 30 60 150 2 0 链霉素 1 5 100 30 28 四环素 15 50 80 0 0 对各 种不 同类 别的 抗生 素具 有抗 性的 天蓝 色链 霉菌 产生 放线 紫红 素的 能力 应用核糖体工程技术进行微生物菌种选育 日本学者Ochi 等比较系统地和深入地将研究结核分枝杆菌对链霉素耐药机制的方法应用于对抗生素产生菌的研究，得到了一些具有应用价值的结果; 为此，他提出了利用所谓的核糖体工程(ribosome engineering)技术来进行微生物菌种选育的概念。 谢谢大家！ THANK YOU SUCCESS * * 可编辑 从表中研究结果可知，对链霉素具有抗性的结核分枝杆菌具有以下三种遗传特性： 由于编码S16核蛋白的基因rpsL发生了突变，从而使该蛋白的43位和88位的赖氨酸变成了精氨酸。结核分枝杆菌的这种突变使其对链霉菌的抗性增加了250～1000倍以上； 由于编码16SrRNA的基因rrs发生了突变，使其523位的A变成了C；使522位和526位的C变成了T。结核分枝杆菌的这种突变使其对链霉素的抗性增加了50～250倍。 从表中研究结果可知，对链霉素具有抗性的结核分枝杆菌具有以下三种遗传特性： 第三种耐药菌的遗传特性还不甚了解，它们对链霉素的耐药程度增加了25～50倍； 另外，用细胞膜活性剂Tween80来试验细菌对药物的细胞通透性发现：对敏感菌和rpsL突变耐药菌基本无效；对rrs突变耐药菌有一定的效果； 但对上述第三种耐药菌的效果最为明显，说明这种耐药菌的耐药机制可能与细胞膜的渗透性有关。 表6-6 由于编码16SrRNA的基因发生突变而引起对链霉素抗性的各种耐药菌的遗传特性 各种菌株 顺序（5’—3’） Chlamydomonas reinhardtii 野生型 5－ATGGAGAGTTTGATCCTG－22 sr－u－sm3 · · · · · G· · · · · · 大肠埃希氏菌 野生