酪蛋白糖巨肽对小鼠肠道双歧杆菌增殖水平的影响-食品科学.PDF

※营养卫生 食品科学 2015, Vol.36, No.17 219 酪蛋白糖巨肽对小鼠肠道双歧杆菌 增殖水平的影响 * 江 岩，陈庆森 ，李俊洁，闫亚丽，赵 培 （天津市食品生物技术重点实验室，天津商业大学生物技术与食品科学学院，天津 300134 ） 摘  要：采用实时荧光定量聚合酶链式反应（real-time polymerase chain reaction ，real-time PCR ）分析不同剂量酪 蛋白糖巨肽（casein glycomacropeptide ，CGMP ）对小鼠肠道双歧杆菌增殖水平的影响，揭示乳源CGMP是否有增 殖肠道关键益生菌的功能。选用50 只健康BALB/c小鼠，随机分为对照组，安慰组（灌胃生理盐水0.2 mL ），乳源 CGMP低、中、高剂量组（灌胃等体积不同质量浓度的乳源CGMP ），灌胃周期为2 周。于灌胃后第0 、3、5 、7 、 9 、11、15天及停止灌胃后1 周（第21天）采集的小鼠新鲜粪便，并进行粪便菌体基因组DNA抽提。依据双歧杆 菌的16S rRNA基因序列设计5 对种属特异性引物，以两歧双歧杆菌（Bifidobacterium bifidum ）CICC6071 的基因组 DNA作为标准品，进行梯度稀释制作标准曲线；分析样品PCR扩增产物的熔解曲线，评价反应的特异性。结果表 明：Real-time PCR可准确定量小鼠肠道内双歧杆菌数量；且灌胃中剂量乳源CGMP可以促进小鼠肠道内双歧杆菌的 增殖，在灌胃第11天时小鼠肠道内双歧杆菌数量达到最高值，即乳源CGMP对小鼠肠道双歧杆菌的增殖作用存在剂 量选择性。 关键词：实时荧光定量聚合酶链式反应；酪蛋白糖巨肽；双歧杆菌；小鼠粪便 Real-Time PCR for Detecting the Growth-Promoting Effect of Casein Glycomacropeptide on Intestinal Bifidobacteria in Mice * JIANG Yan, CHEN Qingsen , LI Junjie, YAN Yali, ZHAO Pei (Tianjin Key Laboratory of Food Biotechnology, College of Biotechnology and Food Science, Tianjin University of Commerce, Tianjin 300134, China) Abstract: Purpose: To analyze the growth-promoting effects of different doses of casein glycomacropeptide (CGMP) on intestinal bifidobacteria in mice by quantitative real-time polymerase chain reaction PCR (qRT-PCR), which reveal whether or not CGMP derived from milk is able to proliferate the key intestinal probiotics. Methods: A total of 50 healthy BALB/c mice were randomly divided into five groups: control group (daily d