癌细胞分子机理研究进展.docVIP

PAGE PAGE 10 癌细胞分子机理研究进展 沈 初 见 （绍兴一中 绍兴 312000） 摘要： 癌症细胞分子机理是生命科学中最重要的研究领域之一。癌基因一直是当今肿瘤基础和应用研究方面的中心课题。人们从癌基因激活表达，癌基因协作，癌基因表达调控等方面入手，了解到细胞癌变的分子基础，为癌症的诊断和治疗，开辟了新的视野。本文试从癌基因入手，从细胞生物学和分子生物学等角度，就当前细胞癌变研究较活跃的几个方面进展综述如下。 关键词：癌基因 癌基因激活表达 癌基因协作 癌基因表达调控 引言 癌细胞的特点是细胞无控制的增殖和生长，不分化，丧失正常的接触抑制能力，并在体内出现浸染性的转移。 针对细胞癌变，许多学者提出假说来解释细胞癌变的原理，如化学致癌假说、病毒致癌假说等等。在1969年Robert Huebner和George Todaro提出了“致癌基因假说”，认为细胞内应当存在能引起癌变的基因，当细胞受到外界致癌因素的作用后这种基因就会被活化而活动起来并产生出癌性蛋白质，最终使细胞癌变。70年代以后，分子生物学迅速发展起来，特别是基因工程技术的发展和日趋完善，有可能采用基因分离、转移和转染技术、DNA重组技术、基因图谱分析技术和DNA序列测定技术及基因表达检测技术等直接在基因水平上研究癌基因，在1976年，第一个癌基因——src基因——分离成功。src基因是鸡Rous肉瘤病毒负责诱发细胞癌变的基因，它在细胞培养体系中能使NIH3T3细胞转化，并维持转化状态，若将转化细胞接种在裸鼠皮下，可生出肉瘤来。从那以后，连续从其他的逆转录病毒中分离出不同的癌基因，迄今共计24种。 逆转录病毒的癌基因提供了理想的探针，此种探针相当于一种很容易识别和探测的信号，人们可追踪它的行踪，所以只要将这些探针与人细胞DNA进行分子杂交，就可探测到这些DNA中是否也含有癌基因。癌基因在细胞癌变中的作用并不是孤立的，必须考虑癌基因调控以及表达活性的激活和表达产物对细胞由于多酶体系的作用等一系列问题，因此在基因水平上阐明癌变原理比单从形态或表形来考虑要复杂得多。 癌基因的激活机理 正常细胞中存在着癌基因，但得癌者毕竟是极少数，这说明在一般情况下癌基因是不活动的。据观察，在正常细胞中各种癌基因的表达产物的量极低甚至检测不出来，而在癌细胞中某种癌基因的表达产物的量以数十数百倍计增加，看来细胞癌变首先需要癌基因的激活表达。 最初提出的一种癌基因激活机理叫促进子（Promoter）插入致癌模式。该模式认为，病毒只要以其所含的促进子插入到细胞癌基因的上游区，就可启动癌基因表达出过量的产物，插入的位置要紧挨着癌基因，离得太远则无效。后来发现不少实验事实用该机制不能解释，比如小鼠淋巴瘤中病毒促进子可插入很多点，但并不一定正好在癌基因上游区的临近处；有的淋巴瘤细胞中虽然病毒促进子正好插入癌基因myc的上游邻近处，但该基因并不增加表达；在有的情况下,病毒促进子插入到远离癌基因的静止区，却也激活了癌基因。 有人认为在正常细胞中癌基因是以原癌基因状态存在着，可能经点突变的刺激开始活化变为活泼的癌基因。1982年底，Weinberg和Barbaced 分别从两个膀胱癌患者的癌细胞中分离出表达的癌基因C—Ha—rasl，经与正常细胞C—Ha—rasl比较，发现前者在第12位密码子上发生了点突变，使原来编码甘氨酸的密码改变为编码缬氨酸。这一发现第一次为突变学说提供了分子依据。通常认为，C—Ha—rasl第12位密码所在的短序列中含有鸟苷三磷酸(GTP)结合位点，在正常条件下该位点上面覆盖着调节蛋白，此种蛋白阻碍了GTP与GTP结合位点的结合，使其不能表达。该序列发生突变后，由于改变了GTP结合位点的结构，除却了调节蛋白的阻碍，使GTP可结合上去，从而激活癌基因。有人证实，在同一个膀胱癌患者的癌细胞、正常膀胱细胞及其外周血白细胞中，C—Ha—rasl第12位密码子都发生了相同的点突变。这一结果提出了这样的疑问：癌基因ras的点突变是否只是一种多态性现象？1988年，Cohen[1]发现上述C—Ha—rasl原癌基因的激活除在第一外显子的第12位发生点突变外，又发现了第2个点突变（G代替A）。作者用人工合成的寡聚核苷酸作引物，用聚合酶链反应（PCR）扩增基因组的DNA，再进行限制性内切酶谱分析。结果指出，在最后一个内显子2719位置发生点突变，引起了C—Ha—rasl癌基因的过分表达，因而提出这是一个新的调控序列，与癌基因的转化活性密切相关。从而证实，虽然有的癌基因确实存在多态性，不过其出现频率较低。至于癌基因的多态性是否使癌细胞对癌变因素变得敏感起来，目前还不得而知。 癌基因发生重排，包括插入、缺失、易位和扩增，都有可能激活癌基因。在人Burkitt淋巴瘤