道地中药材中多种有机氯文档.doc

道地中药材中多种有机氯 杀虫剂残留量检测方法的研究 项目完成人 贾益群 牟 峻＊ 谢文兵 汪冬梅 王 畅 郭鹏然 项目完成单位 国家电化学和光谱研究分析中心 中华人民共和国吉林出入境检验检疫局＊ 摘 要 本方法对人参、淫羊藿、刺五加中15种有机氯农药的毛细管气相色谱测定和GC/MS确认方法的研究。样品经有机溶剂均质提取，Florisil柱净化后，采用不分流进样方式，用PAS-1701弹性石英管柱经柱程序升温技术分离，并用电子捕获检测器检测，外标法定量。气相色谱-质谱（GC/MSD）选择离子检测进行确证。结果三水平的平均回收率为80.6～108.1%，相对标准偏差为2.86～7.73%。并进行了国外与国内产的Florisil净化效果的比较，本法简便，重复性及净化效果好，可用于人参、淫羊藿、刺五加中15种有机氯农药（六氯苯、α-BHC、五氯硝基苯、γ-BHC、七氯、艾氏剂、β-BHC、δ-BHC、环氧七氯、p,p-DDE、狄氏剂、异狄氏剂、o,p-DDT、p,p-DDD、p,p-DDT）残留量检测。 关键词 人参 淫羊藿 刺五加 有机氯农药 毛细管气相色谱 GC/MS 一、前言 关于多种有机氯农药残留量的分析方法，文献报道较较多，目前普遍采用气相色谱电子俘获检测器法（GC-ECD）测定，而采用气相色谱-质谱法（GC-MSD）进行阳性确证方面的研究报道极少。GC-ECD方法灵敏度高，分离效果好，定量准确。经过多年实践运用，已经证明是一种经典适用的分析方法，具有其他方法无可比拟的优点。但在气相色谱分析中，干扰物与待测物在同一根色谱柱具有相同保留时间的现象经常发生，特别是对污染物的不明样品更容易造成假阳性。因此，气相色谱/质谱选择离子法来进行确证是解决这一问题的有效手段。 本研究在采用气相色谱电子俘获检测器法（GC-ECD）测定的同时，重点对气相色谱/质谱选择离子（GC-MSD/SIM）确证条件进行研究试验。经样品前处理条件试验，气相色谱条件选择试验，气相色谱/质谱阳性确证条件试验，回收率试验，精密度试验，方法验证试验。结果表明，各项技术指标均完全满足残留检测和目前国外检测限量（MRL）的需要。 二 实验部分 1 试剂材料 除另有规定外，所用试剂均为分析纯，水为蒸馏水。 1.1 无水乙醚：重蒸馏。 1.2 石油醚：沸程60～90℃，重蒸馏。 1.3 无水硫酸钠：650℃灼烧4h，贮于密封容器中备用。 1.4 硫酸钠水溶液：20g/L。 1.5 弗罗里硅土：(国产为中国医药（集团）上海化学试剂公司；进口为BDH Chemicals LTD)层析用，100～200目，650℃灼烧5h，用前于130℃活化4h，冷却后加入2%（m/m）水脱活，贮于密封容器中备用。 1.6 15种有机氯杀虫剂标准品：α-BHC、β-BHC、γ-BHC、δ-BHC、p,p-DDE、o,p-DDT、p,p-DDD、p,p-DDT、六氯苯、五氯硝基苯、七氯、环氧七氯、艾氏剂、狄氏剂、异狄氏剂，纯度均≥99％。 1.7 混合标准溶液：分别准确称取适量的每种有机氯杀虫剂标准品，用石油醚分别配制成浓度为100?g/mL的标准储备液。根据需要再用石油醚逐级稀释成不同浓度的系列混合标准工作溶液。 2 仪器和设备 2.1 日本岛津公司GCMS－QP5000气相色谱-质谱仪。 2.2 美国惠普公司HP 5890Ⅱ气相色谱仪，配有电子俘获检测器（ECD)。 2.3 德国Heidolph DIAX 900高速均质器。 2.4上海医械专机厂ZFQ 85A旋转蒸发器。 2.5 无水硫酸钠玻璃柱：7.5cm×1.5cm（id）。 2.6 弗罗里硅土层析柱：25cm×1.5cm（id）。 2.7 微量注射器：10μL。 3 测定步骤 3.1 提取 取100g代表性的中药试样，磨碎混均，从混合样中称取试样约5g（精确至0.01g）于250-mL具塞锥形瓶中，加入100mL石油醚，用高速均质器振荡提取3min。将提取液过滤于250-mL分液漏斗中，残渣再用50mL石油醚重复提取一次，合并滤液于上述分液漏斗中。然后加入200mL硫酸钠水溶液，振摇3min，静置分层，收集上层有机相。水相再用2×50mL石油醚重复提取两次，合并有机相。经无水硫酸钠柱脱水，收集于250-mL梨形瓶中，于40℃水浴中旋转浓缩至近干，加入10mL乙醚-石油醚（5+95）以溶解残渣。 3.2 净化 在弗罗里硅土层析中柱自下而上依次填装2cm高无水硫酸钠、10g弗罗里硅土、2cm高无水硫酸钠，并用50mL石油醚淋洗。然后将溶解液倾入弗罗里硅土柱中，用50mL石油醚进行淋洗，弃去流出液，再用50mL乙醚-石油醚（5+95）进行洗脱。收集全部洗脱液于250-mL梨形瓶中。于40℃水浴中旋转浓缩至干，用