鸡新城疫免疫胶体金诊断技术的研究-基础兽医学专业论文.docxVIP

独创性声明本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研 独创性声明 本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研 究成果，尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他 人已经或撰写过的研究成果，也不包含为获得湖南农业大学或其它教育机构的学 位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在 本论文中作了明确的说明并表示了谢意。 研究生签名： 时间：2004年6月14 日 关于论文使用授权的说明 本人完全了解湖南农业大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权 保留送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅，可以采用影印、缩印或 扫描等手段保存、汇编学位论文。同意湖南农业大学可以用不同方式在不同媒体 上发表、传播学位论文的全部或部分内容。 (保密的学位论文在解密后应遵守此协议) 研究生签名： 时间： 2004年6月14日 导师签名： 时间： 2004年6月14日 鸡新城疫免疫胶体金诊断技术的研究摘 鸡新城疫免疫胶体金诊断技术的研究 摘 要 鸡新城疫是鸡的一种高度感染和致死性疾病，是由一种侵害呼吸道、胃肠道 以及中枢神经系统的新城疫病毒(NDV)所引起的。病毒存在于病鸡的血液、 脑、内脏、粪便和口鼻中，国内外对本病的控制仍没有完全解决，鸡新城疫对养 鸡业有着巨大的威胁。所以有必要建立一种快速、简便、准确的胶体金免疫层柝 法(GICA)用于鸡新城疫的诊断。胶体金技术最早是Famk等于1971年报道的 应用于电镜检查技术的一种示踪技术。与传统方法比较，由于胶体金具有肉眼可 观察的红色，所以以这种技术为基础开发的检测试剂盒有快捷、准确、高特异性、 高敏感性的特点，灵敏度可达O．5～ln咖也，适用于各级医院、卫生所、家庭个人 诊断、保健、体检。目前以此方法为基础发展起来的检测试剂盒涉及范围相当广 泛，包括HCG等激素、肿瘤标志物、心血管标志物、传染病的抗原与抗体的检 测等。 采用柠檬酸钠还原法制备胶体金颗粒，标记纯化的鸡新城疫抗体，并包 被在玻璃纤维素膜上，另外将纯化的鸡新城疫抗体和纯化的兔抗鸡抗体包被在硝 酸纤维素膜上，组装成鸡新城疫快速诊断试纸条。当检样中含有鸡新城疫府毒抗 原时，试纸条上出现两条红线，为阳性；当检样中不含有鸡新城疫病毒抗原时， 试纸条出现一条红线，为阴性。用本试验研制的鸡新城疫快速诊断试纸条检测收 集的20份样品，其结果与HA结果相对应，符合率100％。当病毒HA效价在1：32 以上时，试纸条均能检测为阳性。鸡新城疫快速诊断试纸条与已知的禽流感瘸料 和鸡传染性支气管炎病料的上清夜无交叉反应出现。进行热稳定性试验稳定性好。 试验证明，本研究建立的胶体金免疫层析法(GIcA)是一种快速、灵敏、特异 的抗原检测方法，可用于鸡新城疫诊断，也可用于鸡新城疫的流行病学调查，具 有推广价值。 【关键词】 免疫层析法 胶体金 鸡新城疫 试纸条 4 Studies Studies on Immune Colloidal Gold Diagllostic 7rechnique of Newcastle Disease Abstract： Developing a rapid kit for me diagnostic of Chjcken Newcastle disease Chicken Newcastle Disease is a highly infectious锄d deadly disease，it is caused by NDV(Newcastle diseaSe virus)that Viol a_te也e reSpiratoD，们ct、廿le digestive仃act aIld tlle c鲫【衄1c印halic system．The viruses are in blood，brain，imenlal organs、excrement、moutll and nose， 也ere is no complete solution for mis disease at home and a_broad，so“is a big menace for chicken cultivating如dus妇眵So it is necessary to establish a rapid， simple，selfper＆}ming GICA(gold immunochromatographic aSsay)蠡竹也e dia弘osis of Chicken Newcastle Disease．Colloidal gold tecllllique firsny was a kind of也e n-acking techniqu