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如何检测(定性)? 某些化学试剂能够使生物组织中的有关有机化合物产生特定的颜色反应(颜色反应)。 四种物质颜色反应的对比 蛋白质 * * * 检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质 淀粉 蛋白质 脂肪 还原糖 现象 试剂 检测物质 蛋白质 淀粉 脂肪 浅蓝色—棕色—砖红色沉淀 斐林试剂 还原性糖 现象 药品 检测物质 蛋白质 淀粉 橘黄色 红色 苏丹III 苏丹IV 脂肪 浅蓝色—棕色—砖红色沉淀 斐林试剂 还原性糖 现象 药品 检测物质 无色—紫色 双缩脲试剂 蛋白质 淀粉 橘黄色 红色 苏丹III 苏丹IV 脂肪 浅蓝色—棕色—砖红色沉淀 斐林试剂 还原性糖 现象 药品 检测物质 无色—紫色 双缩尿 蛋白质 蓝色 碘液 淀粉 橘黄色 红色 苏丹III 苏丹IV 脂肪 浅蓝色—棕色—砖红色沉淀 斐林试剂 还原性糖 现象 药品 检测物质 一:检测生物组织中的还原性糖类 1)实验原理: 还原糖 + 斐林试剂→砖红色沉淀 2)实验材料:苹果汁 3)试剂:斐林试剂 甲液:质量浓度为0.1g/mL的NaOH溶液 乙液:质量浓度为0.05g/mL的CuSO4溶液 4) 检测的方法步骤 ①向试管内注入2mL待测组织样液。 ②向试管内注入1mL斐林试剂(甲乙液等量混合均匀后再注入)。 ③将试管放入盛有50~65℃温水的大烧杯中加热约 2min。 ④观察试管中出现的颜色变化。 5)实验现象 二:检测生物组织中的脂肪 1)实验原理: 脂肪 + 苏丹Ⅲ→橘黄色 或 脂肪 + 苏丹Ⅳ→红色 2)实验材料:花生种子或花生种子匀浆 3)试剂:苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ 4) 检测的方法步骤 ①向试管中加入2ml待测组织样液 方法一: ②向试管中滴加3滴苏丹Ⅲ染液, 观察样液被染色的情况 5)实验现象 方法二: 制作子叶临时切片,用显微镜观察子叶细胞的着色情况(课本P18—19) 二:检测生物组织中的蛋白质 3)试剂:双缩脲试剂 A液:质量浓度为0.1g/mL的NaOH溶液 B液:质量浓度为0.01g/mL的CuSO4溶液 1)实验原理: 蛋白质 + 双缩脲→紫色 4)检测的方法步骤 2)实验材料:蛋清稀释液 ①向试管内注入2mL待测组织样液。 ②向试管内注入双缩脲试剂A液1mL , 摇匀。 ③向试管内注入双缩脲试剂B液4滴,摇匀。 5)实验现象 斐林试剂与双缩脲试剂的比较 斐林试剂 双缩脲试剂 甲液 乙液 A液 B液 成分 0.1 g/mL NaOH溶液 0.05 g/mL CuSO4溶液 0.1 g/mL NaOH溶液 0.01 g/mL CuSO4溶液 鉴定物质 可溶性还原糖 蛋白质或多肽 添加顺序 甲乙两液等量混匀后立即使用(现配现用) 先加入A液1 mL,摇匀,再加入B液4滴(不能过量),摇匀 反应条件 50~65 ℃水浴加热 不需加热,摇匀即可 反应现象 样液变砖红色沉淀 样液变紫色 斐林试剂用的是甲液和乙液,须现配现用,混合均匀,水浴加热。双缩脲试剂用的是A液和B液,先加A液,后滴B液,不用水浴加热。 1)实验原理: 淀粉 + 碘→蓝色 四:检测生物组织中的淀粉 2)实验材料:马铃薯匀浆 3)试剂:碘液 4)检测的方法步骤 ①向试管内注入2mL待测组织样液。 ②向试管内滴加两滴碘液,观察颜色变化。 5)实验现象 还原糖 蛋白质 淀粉 脂肪 * * * *
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