肌营养不良症CK同工酶及其亚型的研究-临床检验诊断学专业论文.docxVIP

中文摘要 中文摘要 肌营养不良症cK同工酶及其亚型的研究 摘 要 目的肌营养不良症(muscular dystrophy，MD)是一 组遗传性肌肉变性疾病，主要累及肌肉，以肌肉萎缩、无 力为特征，但不侵犯神经系统。橱前尚无有效的治疗手段， 早期诊断、及时治疗对于控制病情的发展、提高患者的生 活质量具有重要意义。对于本病的诊断，肌酸激酶(creatine kinase，CK)的诊断价值已被公认，以CK活性的增高最 为明显，但是有许多报告不支持cK在早期诊断肌营养不 良症及观察病情中的价值。因此我们使用了电泳的方法研 究了MD患者CK．MM亚型及CK．MB亚型变化在早期诊 断、判断病情及观察疗效方面的价值。 ／方法本研究中使用全自动生化分析仪采用动力学方 法测定CK总活力；CK．MB同工酶及其亚型与CK-MM 亚型采用1％琼脂糖电泳，使用不连续的缓冲体系，在稳 流低压(电流30mA，电压在160～220V之间变化)下电泳 30min，使CK分离成同工酶及亚型，加基质液后，放入 42℃恒温箱反应20min，然后放入烘干箱烘干，最后 520nm下荧光扫描。在DMD患者治疗前后CK．MM亚型 的初步观察研究中使用全自动琼脂糖蛋白电泳系统及配 套试剂盒，严格按说明书操作。 结果 1．假肥大型肌营养不良症(Duchennes muscular dystrophy，DMD)从3．32岁分4个年龄段，其CK活性 中文摘要均很高，可达正常人的几倍到几十倍，但个体差异很大。 中文摘要 均很高，可达正常人的几倍到几十倍，但个体差异很大。 其CK—MM。显著低于正常组(P0．05)，随着年龄的增大、 病情的加重，在CK—MM中所占比例逐渐下降，而CK—MM2 则显著高于正常组(P0．05)，并且随年龄逐渐升高， MM2／MM】比值也随之增高； CK-MM3显著高于正常组 (P0．05)随年龄的增长也有升高趋势，但到了20一32岁 年龄段时又有所下降。DMD各年龄组间随年龄增长 CK。MMl逐渐下降，CK．MM2逐渐上升，CK．MM3除20．32 岁年龄组有所下降外，也呈上升趋势，P0．05。 2．肢带型肌营养不良症(1imb．girdle type muscular dystrophy，LGMD)患者的CK总酶活性显著低于DMD 患者，CK．MMl及CK．MM3分别高于和低于DMD患者组， P0．05，两者之间的CK．MM2无显著性差异。 3．3名DMD患者治疗后较治疗前CK．MMl升高 CK-MM2、CK—MM3及MM2／MMl降低。 4．26例DMD病人按年龄分为3组，3．7岁及8—10 岁两组其CK．MB同工酶与对照组比较显著升高 (P0．05)；1 l一24年龄组CK．MB与对照组比较无显著性 差异(P0．05)；DMD患者各年龄组的CK．MB亚型与对照 组比较CK—MBl显著降低、CK．MB2显著升高PO．01)。卜：／ ／ 结论： 1．DMD患者CK活性大大高于对照组，但患者个体 间的差异较大。f同时随着患者病程延长，即病情加重，cK 活力却有所下降，甚至到了病变晚期，CK活性可趋向正 常。因此测定血浆中的CK浓度可用于诊断肌营养不良症， 但不能根据CK活性的高低来判定病情的严重程度。／2，y 中文摘要2．／由于DMD体内羧基肽酶的活性是一定的，不能 中文摘要 2．／由于DMD体内羧基肽酶的活性是一定的，不能 及时将因肌细胞进行性破坏而大量释放的MM3水解成 MM，和MMl，出现MM3和MM2增高的病态分布，MM3、 MM2及MM2／MMl的比值显著高于对照组，肌细胞破坏越 多、越快，CK．MM亚型的改变也愈大，但病情晚期，由 于大量肌细胞已被破坏并纤维化MM3释放速度减慢， MM2相对增多，使得MM2的峰最高。在发病早期MM3 就可轻微增高；肌细胞大量破坏，MM，大量释放时，出 现3个波峰倒置；病变晚期MM2出现大量堆积。说唰。 CK—MM亚型是反映DMD病情变化的重要指标。 3．无论是DMD还是LGMD， CK总酶则有相当大 的个体差异，病变的早期和晚期CK总酶都可以不高，而 其CK．MM亚型的改变始终存在。／DMD患者旱在临床症 状出现前或刚刚出现时，CK．MM亚型的改变就已发生， 此时CK活性往往尚未升高，而且CK—MM亚型的改变也 可见于CK总酶下降的晚期DMD患者。本实验的DMD 病例中有一4岁男孩，其MMl、MM2和MM3分别为 57．7％、26．5％和15．8％，已经开始发生CK—MM亚型的改 变，但仍保持MMlMM2MM3的分布，说明病程较短， 病情较轻，其CK总酶也只有24U／L，该患者的CK总酶 在半年后升高到9533U／L；另有一病程10多年的DMD 患者近年来CK总酶下降至75U／L，而他的MMl、 MM2 和