霍乱毒素B亚单位与荧光金在视网膜神经节细胞逆行示踪中的比较-眼科学专业论文.docxVIP

The differences between Cholera toxin subunit B and Fluoro-Gold in retrograde tracing of retinal ganglion cellsADissertation Submitted to Xinjiang Medical UniversityIn Partial Fullfillment of the Requirements for the Degree ofMaster of MedicineBy Yao FeiOphthalmologyDissertation Supervisor: Professor Xia Xiaobo May,2016论文独创性说明本人申明所呈交的学位论文是在我个人在导师的指导下进行的 研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致 谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果。与 我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确 的说明并表示了谢意。学位论文作者签名：签字日期： 导师签名：签字日期：关于论文使用授权的说明本人完全了解学校关于保留、使用学位论文的各项规定， （选择“同意/不同意”）以下事项：1.学校有权保留本论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借 阅，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文；2.学校有权将本人的学位论文提交至清华大学“中国学术期刊(光 盘版)电子杂志社”用于出版和编入 CNKI《中国知识资源总库》或其 他同类数据库，传播本学位论文的全部或部分内容。学位论文作者签名：签字日期： 导师签名：签字日期：霍乱毒素 B 亚单位与荧光金在视网膜神经节细胞逆行示踪中的比较摘 要目的：比较两种常用逆行示踪剂霍乱毒素 B 亚单位（Cholera toxin subunit B ，CTB）与荧光金（Fluoro-Gold，FG）在 SD 大鼠视网膜 神经节细胞（retinal ganglion cells，RGCs）逆行示踪中的异同。方法：选取 22 只体重 210-240g 的雌性 SD 大鼠，分别在每只大 鼠的双侧上丘和外侧膝状体内同时注射逆行示踪剂。颅内注射 CTB 且术后存活 1 周或 2 周的大鼠被分别记作 CTB-1w 组（n=5 只，10 眼）和 CTB-2w 组（n=5 只，10 眼）；颅内注射 FG 且术后存活 1 周 或 2 周的大鼠被分别记作 FG-1w 组（n=5 只，10 眼）和 FG-2w 组（n=5 只，10 眼）；剩余的 2 只大鼠颅内注射 CTB 与 FG 的等比混合溶液 而作为对照组。术后 1 周或 2 周后对大鼠处死后取材，将视网膜、视 神经和脑组织处理后置于荧光显微镜下观察拍照，用 Image-Pro Plus 6.0 软件对所拍摄的图片进行分析，具体参数包括：RGCs 平均密度、 RGCs 突起平均长度、RGCs 突起平均数目、示踪剂的扩散面积。采 用 IBM SPSS Statistics 22.0 软件对所测数据进行统计分析，设定 p＜0.05 为差异有统计学意义。结果：在 RGCs 平均密度和示踪剂扩散面积上，FG-1w 组和 FG-2w组均明显大于 CTB-1w 组和 CTB-2w 组（p 均＜0.001），CTB-2w 组I明显大于 CTB-1w 组（p 均＜0.001），但 FG-1w 组和 FG-2w 组之间无明显统计学差异(p 均＞0.05)。至于 RGCs 突起平均长度和 RGCs 突起平均数目的统计结果，CTB-1w 组与 CTB-2w 组之间以及 FG-1w 组与 FG-2w 组之间均无统计学差异（p 均＞0.05），但 CTB 组的 RGCs 突起平均长度和 RGCs 突起平均数目无论是在第 1 周还是第 2 周都明 显的大于 FG 组（p 均＜0.001）。同时，研究还发现 CTB 逆行标记 的视神经较 FG 标记的视神经在形态学上更加清晰。结论：（1）CTB 和 FG 均能够在 1 周和 2 周时逆行标记 SD 大 鼠的 RGCs；（2）CTB 标记的 RGCs 在形态学上较 FG 更为清楚，而 FG 标记的 RGCs 在数目上较 CTB 更为全面。关键词：逆行示踪；霍乱毒素 B 亚单位；荧光金；视网膜神经节细 胞；视神经IIThe differences between Cholera toxin subunit B and Fluoro-Gold in retrograde tracing of retinal ganglion cellsAbstractObjective: To compare differences between Cholera toxin subun