DNA的测序方法、原理与应用.pptVIP

西南大学生物技术专业 基因工程 * 2) 蛋白序列序列创建分子分析 服务理念中的“点点” ◆理解多一点 真情浓一点 ◆学习勤一点 品质高一点 ◆理由少一点 效率高一点 ◆处理问题灵活点 工作过程用心点 ◆对待同事宽容点 互相协作快乐点 DNA的测序方法、原理及其应用 一、DNA序列测定概述及其发展 即核酸DNA分子一级结构的测定，是现代分子生物学一项重要的技术。 　　 其基本原理是DNA?的复制反应体系中需要存在DNA?聚合酶、DNA?模板、寡核苷酸引物和dNTP，引物和模板退火形成双链后，DNA?聚合酶在引物的引导下在模板链上沿3’→5’的方向移动，dNTP?按照碱基配对原则，逐个连接在引物的3’-OH?末端。 1963年，Sanger和Thompson等人第一次完成胰岛素51个 氨基酸的序列测定，这在当时来说是一件了不起的大事。70 年代后期，Sanger和MaxamGilbert等人又建立了核酸序 列测定的方法，Sanger双脱氧末端终止法和Maxam Gilbert化学裂解法将核酸序列测定技术推进到“直读”阶段， 使核酸序列测定变得远比蛋白质氨基酸序列测定容易，这样 人们可以通过核酸序列和遗传密码推导出蛋白质氨基酸的序 列。 二、测序的常用方法 DNA序列测定常用方法有如下