临床微生物学概论ppt课件PPT文档.pptVIP

* 菌种鉴定—鉴定到种 根据纯分细菌的形态、菌落特征，特征性的生化反应，选择合适的细菌鉴定系统。 如手工的API条和半自动的ATB 肠杆菌科细菌：API 20E 非发酵革兰阴性杆菌：API 20NE 葡萄球菌属：Slidex Staph Plus、API Staph 链球菌属：Slidex Strepto Kit、API Strep 奈瑟菌属、嗜血杆菌属：API NH 厌氧菌：API 20A * 菌种鉴定—鉴定到种 自动细菌鉴定/药敏仪 VITEK 2 Compact BD Phoenix System MicroScan BIOMIC V3微生物鉴定系统 BIOFOSUN微生物鉴定系统 鉴定到种 葡萄球菌？ 金黄色葡萄球菌！ 细菌鉴定和药敏试验快速化是未来的趋势 张嵘教授课件内容 张嵘教授课件内容 张嵘教授课件内容 CTX-M-14（+） 生理盐水 头孢噻肟 CTX-M-14（-） 质谱检测黏菌素耐药鲍曼不动杆菌 Clinical Infectious Diseases 2015; 60(9):1295–303 敏感株 耐药株 张嵘教授课件内容 * 抗菌药物敏感性试验 * 抗菌药物和药敏试验 抗菌药物是指具有杀菌或抑菌活性的抗生素和化学合成药物。前者是真菌、放线菌、细菌等的代谢产物，后者是经化学改造的半合成抗生素和化学合成药物。 测定抗菌药物在体外对病原微生物有无抑菌或杀菌作用的方法称为药物敏感性试验（Antimicrobial Susceptibility Testing, AST），简称药敏试验。 * 抗菌药物敏感性试验的意义 无法推测敏感或耐药 病人个体化治疗指南 提供经验治疗的依据 建立当地或国家处方政策 监测流行病学趋势 监测细菌耐药性 测试新抗菌药物的抗菌活性 检测新耐药机制的方法 * 抗菌药物敏感性试验分类 定量方法 (MIC, mg/L) 琼脂稀释法 肉汤稀释法 E-test 定性方法 (SIR) 纸片扩散法 自动化仪器 稀释法的定义 以一定浓度的抗菌药与含有被试菌株的培养基进行一系列对倍数稀释，经培养后肉眼观察未见细菌生长管内所含的最低药物浓度为该药对该试验菌的最低抑菌浓度(minimal inhibitory concentration, MIC) 稀释法的最大优点是可以精确测得药物最低抑菌浓度，但需耗费较多材料、人力和时间。 稀释法的分类 稀释法药敏试验因介质不同可分为液体稀释法和琼脂稀释法。 因容器不同分为试管稀释法和微量稀释法，或称常量法和微量。 前者使用无菌的13mm×100 mm试管，每一浓度抗菌药的量至少为1ml； 后者使用8×12的U型底小孔的微量稀释板，小孔内装有0.1ml肉汤。 琼脂稀释法又因在平皿中进行而称为平皿稀释法。 微量稀释法的优点为试剂材料较节省，而且微量板中可预先配制好抗菌药和培养基，冷藏后一定时期内使用，较为方便。 与试管稀释法相比，琼脂稀释法配合多点接种器使用，可同时进行大量菌株的药敏试验，实验结果重复性好，缺点是不能进行最低杀菌浓度(minimal bactericidal concentration, MBC)的测定。 与稀释法药敏试验有关的指标有哪些？ MIC： 最低抑菌浓度 MBC： 最低杀菌浓度 MIC50： 抑制50%受试菌株的MIC值 MIC90： 抑制90%受试菌株的MIC值 MBC50： 杀死50%受试菌株的MBC值 MBC90： 杀死90%受试菌株的MBC值 药物浓度 菌株数 累积菌株数 MIC50 MIC90 0.125 1 1 0.25 2 3 0.5 1 4 1 0 4 2 2 6 2 4 2 8 8 2 10 8 琼脂稀释法 琼脂选择法是将药物混匀于琼脂培养基中，配制含不同浓度药物平板，使用多点接种器接种细菌。 经孵育后观察细菌生长情况，以抑制细菌生长的琼脂平板所含药物浓度为最低抑菌浓度（minimal inhibitory concentration，MIC ） 试验菌的结果报告可用MIC（ug/ml ）或用敏感(S)、中介(I)和耐药(R)报告。 8 16 多点接种仪 试管稀释法 试管稀释法 0.06 0.125 0.25 0.5 1 2 4 8 16 32 MIC＝1ug/ml 微量稀释法 0.06 0.125 0.25 0.5 1 2 4 8 16 32 64 128 A B C D E F G H 微量稀释法 微量稀释法结果阅读 E-试验 E试验原理 E试条（E-test）是一条 5mm×50mm的无孔试剂载体，一 面固定有预先制备的，浓度呈连续指数增长稀释抗生素，另一面有读数和判别的刻度。 将E试条放在细菌接种过的琼脂平板上，经孵育过夜，围绕试条明显可见椭圆形抑菌圈，圈边缘与试条交点的刻度浓度即为抗菌药物对细菌的最