第五章遗传与变异.pptVIP

第五章 病毒的遗传 与变异 遗传和变异，是物种形成和生物进化的基础，病毒以复制的方式产生子代时，病毒的形态结构、宿主范围、毒力、对理化因子的敏感性等可以遗传给子代病毒，然而，可能某个或某些核苷酸的变化导致相应氨基酸变化而使某个性状发生变异。 核酸是承载遗传信息的载体，是生物包括病毒在内遗传变异的物质基础。 3、突变的机理 （1）点突变：在单一核酸的碱基中发生了改变。 （2）缺失突变：在核苷酸中有一段序列被丢失。 （3）插入突变： 在病毒基因组中插入一段核苷酸序列。 （4）易位突变： 核苷酸位置发生转移。 核酸改变的类型 核酸的改变可分为同义突变（沉默突变）、错义突变和无义突变。 同义突变指没有改变氨基酸序列的密码子变化，这与密码子兼并性有关，如：AAA和AAG都编码赖氨酸； 错义突变导致氨基酸的变化影响表型； 无义突变指某个碱基的变化使代表某种氨基酸的密码子变为终止子。 核酸改变的类型 从突变效应与野生毒株的方向关系来讲，可分为正向突变和回复突变，正向突变指改变了野生型的性状，失去的野生型性状可以通过第二次突变得到回复，这第二次突变就称为回复突变。但真正的原位回复很少，大多数是第二点的突变，即原来的突变点带来的效应被第二点的突变带来的效应所抑制，所以又称为抑制突变，如禽流感病毒PB2位点607G-L，701D-N的突变等。 上周回顾 病毒的异常复制与干扰现象 一、缺损病毒：包括干扰缺损病毒、整合的病毒基因组、卫星病毒、条件缺损病毒等 二、顿挫病毒： （1）流产感染 （2）限制性感染 （3）潜伏感染 三、病毒的干扰现象 四、病毒保藏的原则：低温、活化、减少传代 五、病毒保藏方法：低温、冻干法 六、病毒的突变：自发、诱导；点突变、缺失、插入、易位 七、核酸改变的类型。 毒力测定 在易感实验动物、鸡胚、或者易感细胞上测定分离菌毒株的毒力。 LD50 (lathe dose ): 半数致死量 EID50 (embryo infection dose) ：鸡胚半数感染量 ELD50 (embryo lathe dose ): 鸡胚半数致死量 TCID50 (tissue culture infection dose) :组织细胞半数感染量 病毒的鸡胚半数感染量（EID50） 将病毒分别按10倍倍比稀释后，各稀释度的病毒经尿囊腔接种10日龄SPF鸡胚，每个稀释度接种8枚，0.2mL/枚，37℃孵化，连续观察72h，弃去24h内死亡鸡胚，统计各稀释度死亡鸡胚数，并同时通过测定鸡胚尿囊液的血凝活性来判断感染鸡胚数，按Reed-Muench法分别计算EID50（殷震，1997） 1日龄雏鸡脑内接种指数（ICPI） 将病毒尿囊液用灭菌生理盐水稀释10倍后，以0.05mL/羽脑内接种10只1日龄SPF雏鸡，0.05mL/羽生理盐水作对照（对照鸡不应发病，也不计入试验鸡）。每隔24h检查鸡群一次，共观察8d。根据每只雏鸡的症状用数字方法每天进行记录：正常鸡（与对照组雏鸡一样正常）记为0，病鸡（如沉郁、腹泻和出现神经症状等）记为1，死鸡记为2。 ICPI值＝雏鸡在8d内所有数字之和/（10只鸡×8d），如ICPI值为2.00，说明所有鸡24h内死亡；指数为0.00，说明8d观察期内没有雏鸡表现临床症状。 鸡静脉接种指数（IVPI） 将病毒尿囊液用灭菌生理盐水稀释10倍，以0.1mL/羽静脉接种10只6周龄SPF鸡，接种0.1mL灭菌生理盐水作对照（对照鸡不应发病，也不计入试验鸡）。每隔24h检查鸡群一次，共观察10d。根据每只鸡的症状用数字方法每天进行记录：正常鸡记为0，病鸡记为1，重病鸡记为2，死鸡记为3（病鸡和重病鸡的判断主要依据临床症状表现。一般而言，“病鸡”表现有下述一种症状，而“重病鸡”则表现下述多个症状，如呼吸症状、沉郁、腹泻、鸡冠和/或肉髯发绀、脸和/或头部肿胀、神经症状。死亡鸡在其死后的每次观察都记为3）。 IVPI值＝每只鸡在10d内所有数字之和/（10只鸡×10d），如指数为3.00，说明所有鸡24h内死亡；指数为0.00，说明10d观察期内没有鸡表现临床症状。 强毒株多由临床病例分离而来，而弱毒株多需人工选育 弱毒株的来源：自然筛选和人工致弱。均是由DNA上碱基的改变而导致毒力降低的结果。 1、自然弱毒株的选育 自然强毒株在自然因素（异种非易感动物、温度、日光、干燥等）作用下因遗传基因突变形成了与祖代性状(尤其是致病力和抗原性)不尽相同的生物株。 如Lasota是从自然鸡群中分离的、MD的火鸡疱疹病毒FC126株分离于火鸡。 然而，微生物一旦突变后形成具