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第8章 生物传感器;学习目的;8.1 生物传感器的工作原理
8.2 最常用的生物传感器
8.3 生物传感器的应用
本章小结
复习思考题;生物传感器是在基础传感器上再耦合一个生物敏感膜而形成的,生物功能膜上(或膜中)附着有生物传感器的敏感物质,被测量溶液中待测定的物质经扩散作用进入生物敏感膜层,经分子识别或发生生物学反应,其所产生的信息可通过相应的化学或物理原理转变成可定量和可显示的电信号,通过电信号的分析就可知道被测物质的成分或浓度。;血糖-乳酸测定流程;体育上耐力训练;手掌型葡萄糖(glucose)分析仪;工厂发酵车间化验
员正在分析样品;SBA-40型谷氨酸(乳酸)-葡萄糖双功能分析仪;德国研发的环境废水BOD分析仪;按识别功能膜分类;酶传感器由分子识别功能的固定化酶膜与电化学装置两部分构成。由于酶是蛋白质组成的生物催化剂,能催化许多生物化学反应,生物细胞的复杂代谢就是由成千上万个不同的酶控制的。酶的催化效率极高,而且具有高度专一性,即只能对待定待测生物量(底物)进行选择性催化,并且有化学放大作用,因此利用酶的特性可以制造出高灵敏度、选择性好的传感器。
酶的催化反应公式:;当把装有酶膜的酶传感器插入试液时,被测物质在固定化酶膜上发生催化化学反应,生成或消耗电极活性物质(如O2、H2O2、CO2、NH3等),用电化学测量装置(如电极)测定反应中电极活性物量的变化,电极就能把被测物质的浓度变换成电信号,从被测物质浓度与电信号之间的关系就可测定未知浓度,如图8-3所示。;利用酶传感器可以测定各种糖、氨基酸、酯质和无机离子等,在医疗、食品、发酵工业和环境分析等领域获得多方面的应用。例如:酶传感器可以用于水质监测:
酚是一类对人体有害的化合物,经常通过炼油和炼焦等工厂的废水排放到河流和湖泊中。
根据测定水中酚含量的需要,科学家利用固定化多酚氧化酶研制成多酚氧化酶传感器,这种酶传感器可快速测定出水中质量分数仅有的酚。
多功能酶传感器、测定酶活性传感器、半导体酶传感器以及检测难溶于水的物质的酶传感器正在研究之中。随着基因工程技术的开发,使酶传感器的特性会得到进一步的发展。 ;葡萄糖是典型的单糖类,是一切生物的良好能源,测定血液中葡萄糖浓度对糖尿病患者作临床检查是很重要的。葡萄糖传感器是以葡萄糖氧化酶(GOD)为生物催化剂,氧电极为电化学测量装置,通过测定酶作用后氧含量的变化实现对糖的量的测量,如图8-4所示。 ;图中试料中的葡萄糖因葡萄糖氧化酶的作用被氧化,
反应方程为:;氧电极是隔膜型Pt阴电极,氧穿透膜一般是 厚的特氟隆;
测量时将其与Pb阳极浸入浓NaOH溶液中构成电池,溶液中的
氧穿透膜后达到Pt电极被还原,反应方程为:;微生物传感器由固定化微生物膜及电化学装置组成,微生物膜的固定法与酶的固定方式相同,一般用吸附法和包裹法两种。微生物的生存特性对氧气有好气性与厌气性之分,其传感器分为:;好气性微生物生存在含氧条件下,生长过程离不开氧,它吸入氧气而放出二氧化碳,这种微生物的呼吸可用氧电极或二氧化碳电极来测定。将微生物固定化膜与氧电极或二氧化碳电极组合在一起,构成呼吸型微生物传感器,其结构原理如图8-5a所示。;其中将微生物固定于乙酰纤维素等膜上,然后把它附着在隔膜式氧电极的透氧膜上就构成了呼吸型微生物氧电极。把这种微生物传感器放入含有机化合物的试液中,有机物向微生物膜内扩散,而被微生物摄取,摄取有机物时呼吸旺盛,余下部分的氧通过特氟隆膜到达氧电极,而变成稳定的阴极电流。;厌气性微生物的生长会受到氧的妨碍,可由其生成的二氧化碳或代谢产物量来测定其生理状态。当测定微生物的代谢生成物时,可用离子选择电极来测定,如图8-5b所示;微生物传感器是把活着的微生物菌固定于膜面上,作为生物功能元件来使用。目前微生物传感器已用到发酵工艺及环境监测等部门。如通过测水中有机物含量即可测量江河及工业废水中有机物污染程度。医疗部门通过测定血清中的微量氨基酸(苯基丙氨酸和亮氨酸),对早期诊断苯基酮尿素病毒和糖尿病有效。
酶和微生物传感器主要是以低分子有机化合物作为测定对象,但对高分子有机化合物的识别能力不佳。利用抗体对抗原的识别功能和与抗原的结合功能构成对蛋白质、多糖类结构略异的高分子有高选择性的免疫传感器。
;一旦病原菌或其他异性蛋白质(即抗原)侵入人体,会在人体内产生能识别抗原并将其从体内排除的物质(称为抗体),抗原与抗体结合形成复合物(称免疫反应),从而将抗原清除。;图8-6 免疫传感器的结构原理图;根据上述原理,可以把免疫传感器的敏感膜与酶免疫分析法结合起来进行超微量测量,它是利用酶为标识剂的化学放大。化学放大就是微量酶(E)使少量基质(S)生成多量生成物。当酶是被测物时,一个E应相对许多P,测量P对E来说就是化学放大,根据这种原
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