中国水仙水杨酸甲酯合成酶基因克隆与表达分析.pdfVIP

热带亚热带植物学报　2013 ，2 1(2) ：14 1~ 146 Journal of Tropical and Subtropical Botany 中国水仙水杨酸甲酯合成酶基因克隆与表达分析 * 林江波, 王伟英, 邹晖, 戴艺民 (福建省农业科学院甘蔗研究所 , 福建 漳州 363005) 摘要： 为 了解 中 国水 仙(Narcissus tazetta var. chinensis)花香 气 形 成 的分 子 机 理 ，以花 发 育形 成 相关 基 因 的 SSH 文库 获得 的 cDNA 片段 为基础 ，利用 RACE 技术从 中国水仙 花朵 中克 隆 了水杨 酸 甲酯合成酶基 因，命 名 为 NtSAMT1 (GenBank No. JX273470) ，其 cDNA 全长 1323 bp ，包含 1 个 1131 bp 完整 阅读框架 ，编码 376 个氨基酸 ，具有 Methyltransf_7 superfamily 蛋 白 保守 区，与仙女扇(Clarkia breweri) SAMT 蛋 白(1m6eX)的三维结构相似 。系统进化树分析表 明，中国水仙与粳稻 的 SAMT 蛋 白亲缘关系最近。原核表达结果表明 NtSAMT 1 在大肠杆菌 中能高效表达 。半定量 RT-PCR 分析表明， 在花蕾期就 NtSAMT1 有表达 ，第 1 天完全开放时各部位均有表达 ，以雄蕊与雌蕊的表达量最高 ，第 8 天已检测不到表达 。 关键词： 中国水仙 ；水杨酸 甲酯合成酶 ；基 因表达 doi: 10.3969/j .issn.1005–3395.2013.02.007 Cloning and Expression Analysis of NtSAMT1 Gene from Narcissus tazetta var. chinensis * LIN Jiang-bo, WANG Wei-ying, ZOU Hui, DAI Yi-min (Sugarcane Research Institute, Fujian Academy of Agricultural Sciences, Zhangzhou 363005, China) Abstract: In order to understand molecular mechanism of floral scent formation of Narcissus tazetta var. chinensis, based on a fragment cDNA from different florescence suppression subtractive hybridization (SSH), the salicylic acid carboxyl methyltransferase gene was cloned from N. tazetta var. chinensis by RACE and RT- PCR, named NtSAMT1 (GenBank No. JX273470). The full length of NtSAMT1 cDNA was 1323 bp with an 1131 bp ORF, which encoded a protein of 376 amino acids with a conservative domain of methyltransf_7 superfamily. NtSAMT1 is similar to SAMT of Clarkia breweri (1m6eX) in three-dimensional structure. The NtSAMT1 is predicted an unstable protein. Phylogenetic analysis showed that SAMT in Narcissus tazetta var. chinensis had close relationship to t