全自动动物源性鉴定系统.pdf

      全自动动物源性鉴定系统                          背景介绍：           近年来，食品安全问题频发，食品的卫生与安全逐渐成为人们关注的焦点。我 们直击国内的  “老鼠肉、狐狸肉、水貂肉冒充羊肉”事件、“清真招牌下的猪肉 冒充羊肉”、“羊肉卷添加猪肉鸭肉”事件和席卷多国的“马肉风波”以及普遍存 在的香肠掺杂掺假等现象……这些与价格、原料和宗教有关的种种事件，威胁到人 们的日常生活和宗教信仰。由此看来，食品安全问题不可小觑，特别是对肉类的鉴 别，这需要我们能够有可靠且可行的方法进行检测。现阶段肉类检测方法众多，包 括传统方法与现代方法，经典方法与新兴方法。            鉴别肉类的传统方法主要包括视觉、嗅觉、触觉、味觉等。视觉鉴别指通过 对动物肉的酮体、肌肉纹理和颜色、脂肪等直接观察判断；嗅觉鉴别指对肉品的气 味判断鉴别；触觉鉴别指按压生肉品，感知肉品的脂肪、肌肉的硬度和弹性来判 别；味觉鉴别是通过对肉品经加工后的味道来判别。仅仅的感官判别远不能够鉴别 肉类的真假，可作为辅助手段应用。             现有技术在 DNA 水平鉴定动物品种的方法主要是基于直接 PCR 或实时 PCR 测定。少数研究者使用 Sanger 测序来直接鉴定动物品种。这些方法都是单一位点 （最多3 重 PCR）的检测，一来无法知道一份样品中除了靶点之外有无其它 DNA （使商家较容易进行掺假而不被发现），二来对于一些未知动物制品的检测无从下 手，只能一个一个试，还不能保证检测的完整性。            多重连接探针扩增（multiplex ligation‐dependent probe amplification,MLPA ）技 术于 2002 年由 Schouten 等首先报道，是近几年发展起来的一种针对待检 DNA 序 列进行定性和半定量分析的新技术。该技术可以在一次反应中检测多个基因。但之 前 MLPA 大多检测人（单一物种）的多个基因，无需考虑检测基因在其它物种的干 扰。还没有将该技术用于同时检测多个动物物种的基因。          因此，本领域还需要能够灵敏快速并且方便地同时检测产品中多个动物的基因 从而鉴定一个或多个动物物种的方法，以防止商业欺诈并且保护消费者权益。    案例分析：  吃黄焖鸡吃出疑似老鼠头：    2016 年 12 月 10 日中午，河南开封的丁先生通过美团外卖定了一份黄焖鸡米 饭，拿到米饭后，吃着吃着，突然觉得有点不对劲。丁先生说：“当时我玩着手机 吃着饭，突然感觉到一块特别小的肉，吃在嘴里嚼不动，还有毛发之类的东西，吐 出来一看，还有两颗白色的牙齿。”“我第一反应是兔子，但是百度了兔子的构造 后，发现不是这种形状，再查询后发现像是老鼠的构造。”                        客户需求：多重检测是客户需求  羊肉掺假种类多：猪肉、牛肉、鸡肉、鸭肉、鼠肉、马肉、狗肉、猫肉…  肉制品不明肉类：丸子、香肠、罐头      解决方案：  1. 物种选择：  选择了 23 个候选物种，包括：猪、黄牛、水牛、绵羊、山羊、鸡、鸭、猫、狗、大 鼠、小鼠、火鸡、鹿、鸽子、骆驼、鸵鸟、兔子、鹅、马、驴、鹌鹑、狐狸、水貂；  2. 线粒体基因：  线粒体普遍存在于动物细胞当中，相对于基因组，线粒体基因拷贝数高，易于检出，