真核生物基因表达的调控.ppt

真核生物基因表达的调控 (Control of Eukaryotic Gene Exepression ) 1 DNA水平的调控 2 转录水平的调控(transcriptional regulation) 3 转录后水平的调控(post transcriptional regulation) 4 翻译水平的调控(translational regulation) 5 翻译后水平的调控(protein maturation) 真核基因组结构特点 真核基因组结构庞大 3×109bp、染色质、染色体、核膜 单顺反子(monocistron) 含有大量重复序列　 基因不连续性 断裂基因（interrupted gene）、内含子(intron)、 外显子(exon) 非编码区较多 多于编码序列(9:1) 原核生物：生长调控；真核生物：分化调控 多层次调控 真核基因启动子 Ⅰ类启动子 和原核相比真核基因表达调控的一些特点 不同点： （8）真核基因表达调控的最显著特征是能在特定时间和特定的细胞中激活特定的基因，从而实现“预定”的、有序的、不可逆转的分化、发育过程，并使生物的组织和器官在一定的环境条件范围内保持正常功能。 一、真核基因的基因结构与转录活性 1.1 基因家族 1.2 断裂基因（interrupted gene) 1.3 真核生物DNA水平的调控 2. 外显子与内含子的连接区 GT—AG法则： 序列分析表明，几乎每个内含子5’端起始的两个碱基都是GT，而3’端最后两个碱基总是AG，由于这两个碱基的高度保守性和广泛性，有人把它称为GT—AG法则，即：5’GT．．．．．．AG 3’。 在鸡成红细胞的核中，珠蛋白基因对DNaseⅠ的降解是敏感的，而编码卵清蛋白的基因是不表达的，它对DNaseⅠ的降解是不敏感的。 相反，在母鸡输卵管细胞的核中，卵清蛋白基因的序列对DNaseⅠ的降解要比珠蛋白基因的序列敏感得多。 转基因小鼠实验表明，当引入一个包含人beta-球蛋白基因和邻近的不含有DnaseI 超敏感位点的片段时，转基因小鼠中仅表达非常低的人的球蛋白mRNA 水平，但当引入球蛋白基因和5‘与3‘超敏感位点在内的片段时，则转基因小鼠中人球蛋白表达水平提高。 说明超敏感位点是正常基因表达所需要的一个重要的转录调控区域。 甲基化达到一定程度时会发生从常规的B-DNA到Z-DNA的转变。 由于Z-DNA结构收缩，螺旋加深，使许多蛋白质因子赖以接合的元件缩入小沟而不利于基因转录的起始。 DNA甲基化与X染色体失活 剂量补偿： 雌性哺乳动物细胞中两条X染色体之一在发育早期随机失活，以确保与只有一条X染色体的雄性个体内X染色体基因的剂量相同。 巴尔小体: 正常女性的细胞核核膜附近有一团高度凝聚的染色质，而在正常男性的细胞核中没有，Barr于1994年首先发现它。因此它命名为巴尔小体（barr body)。 X染色体失活中心（X-chromosome inactivation center, Xic) Xist(xi-specific transcript): 产物为RNA分子，不含ORF，却含有大量终止密码子，因此并不编码蛋白质，而且该RNA分子只存在于细胞核内，不向细胞质转移。 RNA分子能与Xic 位点相互作用，引起后者构象变化，更容易与各种蛋白因子相结合，最终导致X染色体失活。 Xist 基因的表达决定X染色体失活的关键因素 Xist 基因表达调控又是受到何种因素影响呢？ 活性X染色体上的Xist基因总是甲基化的，而失活X染色体上该位点都是去甲基化的。 一般认为，某个蛋白质如果拥有一个或多个成簇的锌指区，那么它就很可能是转录因子。 三、蛋白质磷酸化对基因转录的调控 蛋白质的磷酸化与去磷酸化过程是生物体内普遍存在的信息传导调节方式，几乎涉及所有生理及病理过程、如糖代谢、光合作用、细胞的生长发育、神经递质的合成与释放甚至癌变。 四、蛋白质乙酰化对基因表达的影响 组蛋白的乙酰化和去乙酰化 组蛋白乙酰转移酶 （histone acetyltransferase, HAT) 组蛋白去乙酰化酶（histone deacetylase, HDAC) 组蛋白N端尾巴上赖氨酸残基的乙酰化中和了组蛋白尾巴的正电荷，降低了它与DNA的亲和力，导致核小体构象发生有利于转录调节蛋白与染色质相结合的变化，从而提高了基因转录的活性。 五、激素对靶基因的影响 类固醇类激素：雌激素、孕激素、醛固酮、糖皮质激素、雄激素 代谢性激素：胰岛素 它们的调控作用都是通过启动基因转录实现的 反式作用因子（trans-acting factor) 能直接