双胚苗水稻中单倍体和二倍体不同器官的cDNA-AFLP分析-遗传.PDFVIP

双胚苗水稻中单倍体和二倍体不同器官的cDNA-AFLP分析-遗传.PDF

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双 胚 苗 水 稻 中 单 倍 体 和 二 倍 体 不 同 器 官 的 cDNA-AFLP 分析 1, 3 2 1 1 1 1 1, 3 张红宇 ,彭海 ,吴绍华 ,黄静 ,徐培洲 ,汪旭东 ,吴先军 1. 四川农业大学水稻研究所,温江611130; 2. 江汉大学生命科学学院,武汉430056; 3. 四川农业大学 西南作物基因资源与遗传改良教育部重点实验室,雅安 625014; 摘要:SARII-628 是四川农业大学水稻所的一个双胚苗自然群体,每年都能定期分离出单倍体与二倍体(n : 2n )。文章对单倍体和对应的二倍体进行了cDNA-AFLP 分析。合成了 3 个单倍体和 1 个二倍体的根、茎、 穗和叶的 cDNA,用EcoR I/ Msp I 酶切组合,通过 cDNA-AFLP 技术统计这 16 个样本的表达差异。共选用 30 对引物,在 633 条扩增位点上筛选出 49 个有差异表达的序列。结果:(1)单倍化后cDNA-AFLP 总体水 平虽然在各单株间略有差异但变化不大,表达变化的位点所占比例平均为 5.14%,高于二倍体的 3.93 %;(2 ) 根据样本在根、茎、穗和叶中表达出带的有无,在扩增出的 14 种带型中,有 4 种只出现在单倍体中,其对 应位点的表达具有单倍体的特异性;(3 )对这 3 个单倍体在不同器官的激活和沉默位点进行汇总,发现在 根和穗中,发生沉默的位点多于激活的位点数,而在茎和叶中的结果正好与之相反,但是在单倍体的所有 器官中发生激活变化的位点多于沉默变化的位点;(4 )对不同器官中的发生表达变化(激活+沉默)位点分 析,发现根中的变化位点最多,在穗中的变化最少,说明位点的表达变化具有器官特异性。 关键词:水稻;激活;沉默;cDNA-AFLP cDNA-AFLP analysis among different organs of haploid and diploid plants in twin-seedling rice 1,3 2 1 1 1 ZHANG Hong-Yu , PENG Hai , WU Shao-hua ,HUANG Jing , XU Pei-Zhou , 1 1,3 WANG Xu-Dong , WU Xian-Jun 1 Rice Research Institute of Sichuan Agricultural University, Chengdu 611130, China; 2 Laboratory of Germplasm and Genetics, College of Life Science, Jianghan University, Wuhan 430056, China; 3 Key Laboratory of Southwest Crop Genetic Resources and Improvement, Ministry of Education, Sichuan Agricultural University, Ya‘an 620514, China; Abstract: SARII-628 is one of the natural twin-seedling populations, which are maintained in Rice Institution of Sichuan Agricultural University. Haploid-diploid (n: 2n) twin-seedlings can annually emerge from SARII-628. In this study, cDNA-AFLP technique was applied for these haploid and diploid plants. The double stranded cDNA were synthesized from the total RNAs of the roots, stems, panicles, and leaves of three haploid and

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