高糖对INS-1细胞损伤存在记忆效应-南方医科大学学报.PDFVIP

高糖对INS-1细胞损伤存在记忆效应-南方医科大学学报.PDF

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·682 · 南方医科大学学报(J South Med Univ ) 2011;31(4) ·基础研究· 高糖对INS- 1细胞损伤存在记忆效应 魏伟平,薛耀明,高 方,朱 波,李晨钟 南方医科大学南方医院内分泌科,广东 广州 510515 摘要:目的观察大鼠胰岛细胞对高糖损伤是否存在记忆效应,并对其机制进行初步探讨。方法 以INS- 1(大鼠胰岛瘤细 胞株)细胞作为研究对象,观察INS- 1细胞经历48 h 持续高糖(33.3 mmol/L)刺激后,纠正高糖状态,以11.1 mmol/L 糖浓度 继续培养,检测细胞活力,凋亡相关基因(bax ,caspase-3)的mRNA 水平和活性氧(ROS )水平的变化。INS- 1细胞处理 组分为:对照组(11.1 mmol/L 葡萄糖×7 d) ;高糖组(33.3 mmol/L 葡萄糖×2 d);3 d 记忆组(33.3 mmol/L 葡萄糖×2 d+ 11.1 mmol/L 葡萄糖×3 d);5 d 记忆组(33.3 mmol/L 葡萄糖×2 d+ 11.1 mmol /L 葡萄糖×5 d)。Real-Time PCR 检测bax ,cas- pase-3 的mRNA 水平,Dihydroethidium(DHE 探针)检测ROS 水平,MTT 法测定细胞活力。结果 高糖组细胞活力较对照 组显著降低(P0.001)。而ROS 水平,bax,Caspase-3 的mRNA 水平较对照组显著增高(P0.05)。在3 d 记忆组及5 d 记忆 组,细胞活力较对照组显著降低(P0.001) ,ROS 水平,bax,Caspase-3 的mRNA 水平较对照组显著增高(P0.05)。结论 高 糖对INS- 1细胞的损伤存在记忆效应,主要表现为细胞活力的持续降低,促凋亡基因的持续高表达。ROS 水平的持续升 高可能与记忆效应产生有密切关系。 关键词:血糖;活性氧;胰岛细胞;记忆效应 中图分类号:R587.1 文献标志码:A 文章编号:1673-4254(2011)04-0682-04 Cellular memory of high glucose exposure in normoglycemia is probably mediated by reactive oxygen species in INS-1 cells WEI Wei-ping, XUE Yao-ming, GAO Fang, ZHU Bo, LI Chen-zhong Department of Endocrinology and Metabolism, Nanfang Hospital, Southern Medical University , Guangzhou 510515, China Abstract: Objective To investigate the cellular memory of previous high glucose exposure in rat islet cell line (INS-1) and explore the possible mechanism. Methods INS-1 cells were exposed to a high glucose (33.3 mmol/L) culture for 48 h followed by further culture in the presence of 11.1 mmol/L glucose in the culture medium for 3 or 5 days. The levels of bax and caspase-3 mRNA were measured by real-time PCR, the production of reactive oxygen species (ROS) was assayed

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