马铃薯甲基转移酶和去甲基化酶预测及表达研究-微生物学专业毕业论文.docxVIP

罂燃原创性声明 罂燃 原创性声明 经注明引用的内容外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得凼塞直太堂及 学位论文作者签名：脚 指导教师签名： 日 期：出!竺!垒』：毁日 期： 在学期间研究成果使用承诺书 本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，即：内蒙古大学有权将学位论文的全 部内容或部分保留并向国家有关机构、部门送交学位论文的复印件和磁盘，允许编入有关数据库进行检索， 也可以采用影印、缩印或其他复制手段保存、汇编学位论文。为保护学院和导师的知识产权，作者在学期 间取得的研究成果属于内蒙古大学。作者今后使用涉及在学期间主要研究内容或研究成果，须征得内蒙古 大学就读期间导师的同意；若用于发表论文，版权单位必须署名为内蒙古大学方可投稿或公开发表。 学位论文作者签名：狮 指 日 期：q＆f丝!翌≤1 2 日 期 马铃薯甲基转移酶和去甲基化酶预测及表达研究 马铃薯甲基转移酶和去甲基化酶预测及表达研究 摘要 DNA甲基化是一个稳定的表观遗传标记，与去甲基化共同参与调节植物的 多种生物过程，包括转座子的沉默与激活、基因印记以及x染色体失活等，对 植物生长发育有着重要作用。DNA甲基化由甲基转移酶建立和维持。去甲基化 由去甲基化酶催化参与。 迄今为止，关于拟南芥DNA甲基化和甲基化相关酶的研究已经有很多，而 马铃薯DNA甲基化的研究却较少，其甲基转移酶和去甲基化酶还没有报道。本 研究通过同源序列比对预测马铃薯DNA甲基转移酶和去甲基化酶，构建其与拟 南芥、水稻、玉米等12个物种相关基因的系统进化树，比对分析相关序列的核 心蛋白结构域，最终预测马铃薯有9个DNA甲基转移酶和4个去甲基化酶基因。 通过实时荧光定量PCR技术分析这些甲基转移酶和去甲基化酶在马铃薯栽培种 大西洋的根、茎、叶、花、匍匐茎和成熟薯块中的表达状况，同时利用去甲基 化试剂Zebularine处理马铃薯试管苗，观察植株表型并检测甲基转移酶和去甲基 化酶的相对表达量，了解去甲基化处理后植株的生长和甲基转移酶和去甲基化 酶的组织表达变化。结果表明，马铃薯根、茎、叶等六个组织中，两个预测的 染色质域甲基转移酶基因CMTl．，、CMTl．2和一个去甲基化酶基因DMEb均是 不表达的。在成熟薯块中，大部分甲基转移酶和去甲基化酶基因的表达均在较 低的水平，从而推测马铃薯块茎形成过程中甲基化模式与其它物种有很大的区 别。经过去甲基化试剂Zebularine的处理后，甲基转移酶和去甲基化酶的表达产 别。经过去甲基化试剂Zebularine的处理后，甲基转移酶和去甲基化酶的表达产 生一定的变化，然而CMTl．J、CMTl．2和DMEb依旧没有表达，由此，推测这 几个序列在基因组中是没有功能的。 关键词：DNA甲基化；甲基转移酶；去甲基化酶；进化树； Zebularine PHYLOGENETICS PHYLOGENETICS AND EXPRESSION 0F METHYI』RANSFERASES AND DEMETHYLASES IN POTATO AB STRACT DNA methylation is a stable epigenetic mark．Methylation and demethylation play important role in diverse biological processes，including gene and transposon silencing，imprinting and X chromosome inactivation．These processes are involved in the growth and development of plant．Methyltransferases maintain and establish methylation，while demethylases catalyze the process of demethylation． As the third most important food crop in the world，potato has not been well studied in its DNA methylation，and the putative methyltransferases and demethylases have not been characterized．In this study,we analyzed sequence homology in order to predict potato methy7ltransferases and demethylases，made ami