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微生物培养基配制实验报告(共5篇) 　　一、实验题目：培养基的制备与灭菌　　二、实验目的：　　1、明确培养基的配置原则，掌握配置方法。　　2、了解灭菌的原理，学习掌握灭菌器的使用方法。　　三、实验器材：　　1、药品：牛肉膏、蛋白胨、氯化钠、水、琼脂。　　2、仪器：三角瓶、培养皿、试管、线绳、棉花、烧杯、报纸、移液管、试管架、铁针、量筒。　　四、实验原理：　　1、培养基的制备　　包括一下几种成分：　　水分：主要成分。　　N源：包括无机氮和有机氮。　　C源：主要是含碳有机物、碳氢化合物等。　　无机盐：如NaCl、KH2PO4等。　　微量元素：Cu、K、Mg、S、P、Zn。　　有些还需要添加“生长因子”，通常是维生素类、某些氨基酸或核酸等。　　2、培养基配置的原则　　根据不同的培养对象及培养目的，选用不同的培养基，但有机物总量不得超过15%，盐类一般不超过1%。　　培养基有以下分类：　　按成分：天然培养基、合成培养基、半合成培养基　　按状态：固体培养基、半固体培养基、液体培养基　　按用途：基础培养基、营养培养基、鉴别培养基、选择培养基　　培养基配好后应立即灭菌，防止营养物质中的微生物富集。　　3、灭菌：　　用理化手段杀灭一切微生物的营养体，包括芽孢和孢子，在实验中应对所有仪器、操作场所、药品及培养基灭菌或消毒。　　高压蒸汽灭菌：将物品放入封闭的加压灭菌器，加热使灭菌锅套间的水沸腾产生蒸汽，将冷空气排尽，压力上升，使水沸点变高，导致菌体蛋白质变性，一般、121℃、15~30min可以彻底灭菌，本次实验灭菌20min。若是含糖培养基，110℃、30min。　　干热灭菌：微生物细胞内蛋白质因高温而凝固变性。因高温，所以含水量小，不利于蛋白质受热变性，所以温度高，时间长。　　紫外灭菌：诱导胸腺嘧啶二聚体形成抑制DNA复制。　　过滤除菌：实验室中用微孔滤膜。除病菌需更小。　　五、实验步骤：　　1、牛肉膏蛋白胨培养基的制备　　依次准确称取牛肉粉、蛋白胨、放入烧杯，加入100mL水，用玻璃棒搅匀溶解，移入三角瓶，并加入琼脂。加上棉塞，迅速拔出能发出清脆声响即可，用报纸包住并系好麻绳。　　2、包移液管和培养皿　　包一包培养皿：用手压紧、塞好，折出棱角，包好后摇晃没有培养皿相互碰撞的声音即可。　　包2支移液管：用棉花塞好移液管尾部，露出1~2cm即可。取长条报纸，一端折　　90°角，紧密严实沿30°角卷好移液管，尾部叠好防止散开。　　3、高压蒸汽灭菌　　灭菌前要先看水位是否合适。　　将包好的待灭菌物品放入内层锅，不要装得太挤，棉塞不应染上培养基。　　加盖，两两对称旋紧螺栓。　　设定条件：、121℃、20min，进行加热。　　先打开排气阀，待空气排尽后，关上排气阀。　　结束后，自然降温，压力降为0后，打开排气阀取出物品。　　4、干热灭菌　　将包好的待灭菌物品放入电热干燥箱内，关好门箱。　　设定条件：160~170℃，恒温2h。　　结束后，切断电源，自然降温，降到70℃以下后开箱取物。　　六、思考题：　　1、你配制的是什么培养基？　　选择培养基。　　2、选择培养基与鉴别培养基的区别？这两种培养基的应用情况。　　选择培养基是指根据某种微生物的特殊营养要求或其对某化学、物理因素的抗性而设计的培养基。其功能是使混合菌样中的劣势菌变成优势菌，从而提高该菌的筛选效率。如以纤维素作唯一碳源的培养基可分散到分解纤维素的微生物分散酵母菌或霉菌时，可添加适量的青霉素、四环素或链霉素，以抑制细菌和放线菌的生长。　　鉴别培养基是在成分中加入有能与目的菌的无色代谢产物发生显色反应的指示剂，从而达到只须用肉眼辨别颜色就能方便地从近似菌落中找到目的菌菌落的培养基，此类培养基一般用于鉴定不同微生物。如EMB即伊红美乳糖造就基。大肠杆菌分解乳糖产生大量混合酸，可染上酸性伊红，伊红和美兰结合，菌落被染成深紫色，从菌落外貌的发射光中还可以看到绿色金属发光。　　培养基的配制与灭菌　　一、实验目的　　1.了解一般培养基配制原理，掌握培养基常规配制程序。　　2.了解培养基配制过程各环节的要求和注意事项，掌握实验室各种灭菌技术及玻璃器皿的包装方法。　　二、基本原理　　培养基是供微生物生长、繁殖、代谢的混合养料，主要含有微生物生长繁殖所必需的碳源、氮源、无机盐、生长因子及水分，并要求具有适宜的pH值、合适的渗透压等。由于微生物具有不同的营养类型，对营养物质的要求各不相同，加之实验和研究的目的不同，所以培养基的种类很多，使用的原料各有差异，但一般配制程序却大致相同。　　三、实验材料　　1.器皿及材料　　天平、称量纸、钥匙、精密pH试纸、量筒、刻度搪瓷杯、试管、橡胶塞、试管架、三