毛细管电泳电化学发光检测麻黄碱类药物及检测器的改进分析-分析化学专业毕业论文.docx

独创性声明本人声明，所呈交的论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取 独创性声明 本人声明，所呈交的论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取 得的研究成果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论 文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得信阳 师范学院或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作 的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示 了谢意。 签名 仂 日期：必，，年J月柏 学位论文使用授权书 本人完全了解信阳师范学院有关保留、使用学位论文的规定，即学校有 权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文 被查阅和借阅。本人授权信阳师范学院可以将本学位论文的全部内容编 入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或其他复制手段保存或汇 编本学位论文。同时授权经信阳师范学院认可的国家有关机构或论文数 据库使用或收录本学位论文，并向社会公众提供信息服务。 (保密的论文在解密后应遵守此规定) 研究生。签名，喜和伊导师。签名， 19喘纱∥椭妇 毛细管电泳(CE)，又称高效毛细管电泳(HPCE)是一类以电场为驱动力，以 毛细管电泳(CE)，又称高效毛细管电泳(HPCE)是一类以电场为驱动力，以 毛细管为分离通道，以样品的多种特性(电荷、大小、等电点、亲和行为、相分配 特性等)为根据的高效分离分析技术。是继气相色谱(GC)和高效液相色谱(HPLC) 之后分析科学的又一重大进展，使分析科学得以从微升水平进入纳升水平，并使单 细胞、乃至单分子分析成为可能。毛细管电泳具有分离模式多、分离效率高、分析 速度快、耗样量少、仪器简单等特点，已被用于蛋白质分离、糖分析、手性分离、 DNA测序、单细胞分析及疾病早期诊断等。但作为其分离通道的毛细管内径尺寸 小(25---100 lam)，给检测带来了困难，导致CE的检测灵敏度不高。因此，改善检 测灵敏度一直成为毛细管电泳领域的重要研究方向之一。 电化学发光(ECL)具有灵敏度高、线性范围宽、反应可控性强、试剂耗量少、 获得分析信息多和反应效率高等优点。毛细管电泳与电化学发光的结合，兼备了 CE高分离效率和ECL高灵敏度的优点，可用于复杂样品中痕量组分的分离和测定。 本文利用CE．ECL联用技术，开展了两种重要麻黄碱的分析检测；并结合 CE．ECL联用技术的相关原理，开展对其检测器的改进研究；主要研究内容和创新 点如下： 1．利用毛细管电泳电化学发光首次建立一种测定一对非对映异构体盐酸麻黄 碱和盐酸伪麻黄碱的新方法。对电泳缓冲液类型、毛细管电泳分离条件、电化学发 光检测条件的影响进行了系统研究。在优化实验条件下：检测电位，1．2 V；进样电 压，10 kV：进样时间，10 s；分离电压12 kV；电泳缓冲溶液选择，15 mmol／L phosphate-borax，pH 7．4；电化学发光溶液，5 mmol／L Ru(bpy)32+于50 mmol／L磷酸 盐，pH 8．5，两种差向异构体麻黄碱在5 min内获得良好的分离。盐酸麻黄碱和盐 酸伪麻黄碱的检出限分别为4．5×10。8 mol／L和5．2×10一mol／L。盐酸麻黄碱和伪麻 黄碱在三个不同浓度水平的加标回收率在89．6％～103．4％范围内，相对标准偏差 (RSD)不大于5．3％。在尿样中，盐酸麻黄碱和伪麻黄碱的定量限分别为：6．9×lff7 mol／L和7．7x107 mol／L。将所提出的方法成功应用于人尿样中盐酸麻黄碱和盐酸伪 麻黄碱的测定和呋麻滴鼻液中盐酸麻黄碱含量分析，并对盐酸伪麻黄碱在人体内的 药代动力学进行了研究。提出的方法在药物治疗监测和临床分析方面有潜在的应 用。 2．通过对CE．ECL检测器的改进研究，研制了一套新型的CE．ECL检测系统。 在传统的 CE-ECL 检测系统中，其检测对象一般是电化学发克共反应试剂。本新咆 装青不仅可用于电化学发光共反应试剂的检测，更重要的是可检测 ECL 发克体及真 标记物，并有望应用于蛋白质大分子生物活性物质的检测及免疫分析。拓宽了 CE-ECL 的应用范围，功能更全面。 关键词:毛细管电泳:电化学发光;麻黄碱:尿样分析:药代动力学:检测器 11 Capillary Capillary electrophoresis(CE)，namely high performance capillary electrophoresis (HPCE)is a highly efficient means of separation，which is performed in capillary tube and driven by electric field．It brings a profound revolution f