棉花抗黄萎病遗传及分子标记分析-作物遗传育种专业毕业论文.docx

摘要棉花是主要的经济作物，在世界及我国国民经济中占重要地位。棉花黄萎病 摘要 棉花是主要的经济作物，在世界及我国国民经济中占重要地位。棉花黄萎病 是严重危害棉花生产的病害之一，在世界范围内流行。虽然国内外学者已对棉花 黄萎病菌的致病力分化、致病机理、抗病机制、抗性鉴定、抗性遗传及分子标记 等方面做了大量卓有成效的工作，但仍难以满足棉花生产发展的需求。因此，从 棉花生产需求出发，进一步开展针对上述有关问题的研究，不但有益于棉花遗传 育种学和病理学的发展和完善，而且对棉花抗病育种工作和提高病害综合防治成 效等，具有重要的理论和实践意义。 以抗落叶型黄萎病棉花品种‘常抗棉’，耐黄萎病品系‘中5173’、‘河北抗 黄’、‘山东抗黄’及感病品种‘TM一1’、‘军棉1号’、‘新陆早l号’、‘感病1号’ 和高抗黄萎病的海岛棉品系‘海7124’9个材料配制2组双列杂交组合，对亲本 及F。的黄萎病病情指数等主要性状进行了研究，采用MINQUE(1)法估算方差分量， 采用AUP法预测遗传效应值。遗传估算方差结果表明，在病圃人工接菌条件下， 陆地棉品种对黄萎病的抗性属微效多基因控制的数量性状，以加性遗传效应为主， 显性效应为次，不存在母体效应。亲本遗传效应预测值表明，抗及耐黄萎病品种 与感病品种之间存在极显著差异，抗病亲本‘常抗棉’和‘河北抗黄’两个亲本 的抗病性遗传性较好。协方差分析表明，表示黄萎病抗性两个性状(成株期平均 病指及收获期剖秆相对病斑长度)之间存在极显著的正相关，而黄萎病与产量性 状之间存在极显著负相关，与产量构成因素衣分及单位面积总铃数也呈显著负相 关，可见棉花黄萎病是通过降低衣分和减少单位面积总铃数来影响棉花产量的。 利用感黄萎病的陆地棉标准系‘T卜1’和抗黄萎病棉花品种‘常抗棉’两个陆 地棉品种杂交并自交，获得109个F2单株及F：：。家系为作图群体，以SSR、RAPD和 SRAP三种分子标记进行抗黄萎病性状的分子标记筛选。结果从1611对(条)引物 中仅筛选到70对(条)多态性引物，获得75个多态性位点并进行标记间的连锁性 分析。75个标记构建了一个包括15个连锁群，全长535cM的陆地棉品种间分子标 记遗传连锁图，标记间平均距离为11．15cM，有27个标记不能进入任何连锁群。连 锁群的标记数最少2个，最多6个：长度从1．OcM到92．7cM不等。对其F：：。家系的 成株期抗黄萎病性状即平均病指的分布进行分析，显示其呈正态分布，进一步说明 陆地棉对黄萎病的抗性为数量遗传；单标记分析及复合区间作图，检测出与抗黄萎 病性相关的3个QTL，分别位于第3、5、6连锁群上，贡献率分别为14．15％、3．43％ 病性相关的3个QTL，分别位于第3、5、6连锁群上，贡献率分别为14．15％、3．43％ 和18．78％。另外，对该群体生长过程中黄萎病不同发病高峰期的病情也进行了分析。 利用感黄萎病陆地棉品种‘新陆早1号’和抗黄萎病海岛棉品种‘海7124’杂 交产生的76个F2单株及F2：3家系为材料，以1142对棉花SSR引物进行分子标记筛 选，其中478对在双亲间具有多态性，获得508个多态性位点。用Mapmaker3．0对 多态性标记进行连锁性分析，构建了一个包括466个位点，42个连锁群，全长 4604．7cM，覆盖大约92．1％棉花总基因组的分子标记遗传连锁图，标记间平均距离 为9．88cM。连锁群的标记数最少2个，最多36个；长度从4．1cM到440．2cM不等。 并根据已经通过非整倍体或连锁图确定染色体位置的SSR位点，将本研究所得的32 个连锁群定位到23条染色体上。对多态性标记进行偏分离检测分析，有56个标记 存在显著偏分离，占11．7％，其中有46对标记进入连锁群，占连锁群标记数的9．87％， 4对标记与抗病性相关。用QTLCartographerV2．0软件对所获得的F2：3家系性状进 行单标记分析及复合区间作图，检测出与抗黄萎病性相关的6个QTL，分别位于第 3、5、22、25连锁群上，贡献率分别为5．44％、10．82％、15．95％、33．29％、45．89％ 和71．26％。同时也对该群体生长过程中黄萎病不同发病高峰期的病情也进行了分 析。 通过比较陆陆群体与海陆群体构建的两张连锁图谱，发现陆地棉品种间连锁图 谱与海陆种间连锁图谱存在一定的相关性。陆陆群体构建的连锁群LG03上的全部5 个中的4个SSR标记(1个未出现在连锁图谱中)和LG09上的全部2个SSR标记 同在海陆群体连锁群IWJ02(染色体Chrl8)上出现，但标记相连的顺序存在差别； 连锁群LG05上的全部3个中的2个SSR标记(1个未出现在连锁图谱中)同样出 现在海陆连锁群LG22上，连锁群LGl2上的1个SSR标记(另一个为SRAP标记) 在