罗格列酮对OLETF大鼠股骨骨密度及成骨细胞BMP2和BcoxL表达的影响-基础医学;人体解剖与组织胚胎学专业毕业论文.docxVIP

学位论文中文摘要 学位论文 中文摘要 目的 糖尿病(DM)是目前继心脏病、肿瘤严重危害人们健康的疾病，随着老龄化 社会的到来，糖尿病发病率逐年增加。糖尿病性骨质疏松(DOP)属于继发性骨质 疏松(OP)，是DM最常见的一种并发症，伴随营养、代谢、内分泌等多因素的 变化而发生的一系列病理性改变。 OLETF鼠是一种自发性2型糖尿病大鼠，本实验以OLETF鼠作为2型糖 尿病模型，以LETO鼠和摄入罗格列酮的OLETF鼠作为其对照，通过观察大鼠 股骨病理变化、测定骨密度(BMD)及成骨细胞骨形成蛋白．2(BMP．2)、Bcl．xL表 达水平，来探讨2型糖尿病本身对骨及罗格列酮对糖尿病大鼠骨的影响及特点。 方法 大鼠在无特定病原体(SPF)级条件下单笼饲养，饲以标准饲料，12／12h光照 黑暗循环，自由获取食物和饮水。定期行口服葡萄糖耐量试验(OGTr)监测血糖， 以血糖峰值16．7 mmol／L和负荷后120 min血糖11．1 mmol／L诊为糖尿病，只具 备上述l条为糖耐量减低。至30周时，共有成模OLETF大鼠12只，随机分为 糖尿病对照(DM)组、罗格列酮(RGZ)组(每组6只)，8只LETO鼠为正常对照(NC) 组。RGZ组：罗格列酮以蒸馏水溶解稀释，给药剂量为3mg／kg·d。DM组与 NC组以等量蒸馏水灌胃，各组均灌胃给药12周，每日1次。 处死大鼠，取大鼠离体的左右后肢股骨，仔细剥离表面附着的软组织，避 免损伤骨表面。左后肢股骨用磷酸盐缓冲盐水浸湿的纱布包裹后．20℃保存备做 BMD、骨胶原含量及骨灰干重比的检测。右后肢股骨置于1 0％中性福尔马林溶 液中固定后用lO％EDTA脱钙备做HE及成骨细胞BMP．2、Bcl．xL免疫组化染 色。应用多媒体分析软件进行骨组织形态计量学分析，采用SPSSl3．0软件进行 统计学分析。 结果 1．大鼠一般状况比较：OLETF大鼠较LETO肥胖、活动迟缓、懒动、精神 萎顿、少动闭眼、弓背蜷缩、喜扎堆、畏寒喜暖、毛色干枯无光泽。 2．股骨BMD比较：与DM组【(O．1984-0．011)g／cm2】相比，NC组 BMD[(0．220d：0．012)g／cm2】升高(尸0．01)，RGZ组BMD[(0．1724-0．012)∥锄2】降低 (尸O．01)。 天津医科人学硕十学位论文3．骨灰干重比：与DM组(O．521±O．012)相比，NC组股骨灰干重比(O．538 天津医科人学硕十学位论文 3．骨灰干重比：与DM组(O．521±O．012)相比，NC组股骨灰干重比(O．538 ±0．018)升高(P0．05)，RGZ组(O．492___0．011)股骨灰干重比降低(p0．01)。 4．股骨脱钙状况比较：与DM组相比，NC组股骨脱钙时间延长，(骨重． 脱钙后骨重)／骨重比值升高，相比有统计学意义(尸≮0．01)。而RGZ组相对于DM 组脱钙时间缩短，(骨重．脱钙后骨重)／骨重比值降低，相比有统计学意义(氏0．05)。 5．空骨细胞陷窝率、成骨细胞(oB)和破骨细胞(oC)计数变化：与DM组相 比，NC组空骨细胞陷窝率及OC计数降低(尸O．01或P0．05)，OB计数升高 (P0．01)。RGZ组相对于DM组空骨细胞陷窝率及OC计数升高(尸0．01)，OB 计数降低(p(O．05)。 6．股骨胶原含量比较：与DM组[(185．60+19．38)mg／g]相比，NC组股骨胶 原含量[(243．274-22．19)mg／g]升高(尸0．01)，RGZ组[(158．81 4-17．65)mg／g]降低 (P0．05)。 7．成骨细胞Bcl．xL表达变化：与DM组(84．83 4-10．82)相比，NC组成骨细 胞Bcl．xL阳性表达平均灰度值(69．134-11．56)降低衅O．05)，RGZ组成骨细胞 Bcl．xL阳性表达平均灰度值(110．17±15．33)升高(P0．01)。 8．成骨细胞BMP．2表达变化：RGZ组成骨细胞BMP．2阳性表达的吸光度 值(O．424 7+0．032 1)明显低于DM组(0．488 6-a：0．039 8)，而DM组阳性表达的吸光 度值明显低于NC组(0．557 1+0．040 2)，结果有统计学意义(JP《O．01)。 结论 1．该模型大鼠明显肥胖，可作为研究2型糖尿病骨代谢紊乱的理想动物模型。 2．糖尿病状态下大鼠表现为骨密度和骨量减少，大鼠可出现明显的骨组织形态 结构异常，成骨细胞功能障碍可能是糖尿病骨代谢失衡的主要机制，但破骨细 胞也可能参与其中。 3．该糖尿病模型大鼠存在骨胶原代谢异常和结构紊乱，前者表现为骨胶原的合 成及含量减少，后者表现为骨胶原连续性差且排列不整齐。骨胶原代谢异常可 能与成骨细胞数量下降或功能障碍相关。 4．罗格列酮对自发肥