酶的制备及活力测定.ppt

节酶的制备及活力测定 ;课程标准 ．研究酶的存在和简单制作方法。 ．尝试利用酶活力测定的一般原理和方法。 课标解读 ．了解酶的合成、作用与分布。 ．理解提取和制备酶的简单方法。 ．掌握酶活力测定的一般原理、方法及影响因素。; ()酶的合成 酶是在生物体中合成的。 ()酶的分布 多数酶在直接参与生物化学反应，少数的酶要分泌到发挥作用。;()酶的提取 提取细胞内的酶，可用、 或等机械将组织细胞破碎，经、制备成粗酶液；提取分泌到细胞外的酶，如 、 等，可以直接从动物或细胞外的中提取。 ()酶活力的表示方法 酶的活力通常以单位时间内或者在单位时间内来表示。 ()测定酶活力原因 在提取过程中， 等多种环境条件都可能影响酶的，导致酶，直至丧失。;．酶的分布与提取; 分光光度法是通过直接测定溶质对光的吸收能力来确定溶液浓度的方法。 测定过程如下： ①配制梯度浓度标准溶液； ②测出标准溶液的吸光值：在分光光度计上，选取特定的波长，测出上述各溶液的吸光值； ③绘制标准曲线：以各种标准溶液的浓度为横坐标，相应的吸光值为纵坐标，在方格坐标纸上绘制标准曲线； ④测定待测样品的吸光值； ⑤查找浓度，计算物质的含量：根据测出的吸光值，在标准曲线上查找它的对应浓度，计算待测物质的含量。; 下列各项能表示酶活性高低的是 (　　)。 ．单位时间、单位体积内反应物的总量 ．一段时间后生成物的总量 ．一段时间后，一定体积中消耗的反应物的量 ．单位时间内、单位体积中反应物的减少量或产物的增 加量 解析　酶活性的高低可以用在一定条件下，酶所催化的某一化学反应的反应速率表示，而酶反应速率是指单位时间内、单位体积中反应物的减少量或产物的增加量。 答案　;植物淀粉酶的制备及活力测定 ()提取酶液：称取 萌发的种子，加 ， 研磨成匀浆，倒入 的中，加稀释 定容至 ，在下放置～ ，然后以 离心 ，取出上清液(内含淀粉酶)。将其中一部 分上清液在，使酶失活。 ()滴加酶液：取支试管，编号、、、。向、号试 管中各加入 ；向、号试管中加 入 。;同时;()绘制。 ()查找含量。 ()计算淀粉酶的活力。;．酶的制备; ()原理 淀粉酶活力的大小与产生的麦芽糖的量成正比。麦芽糖与，-二硝基水杨酸试剂反应，生成黄褐色产物。用标准浓度的麦芽糖溶液制作标准曲线，用分光光度法测定淀粉酶作用于淀粉后生成的麦芽糖的量，以单位重量样品在一定时间内生成的麦芽糖的量表示酶活力。 ()活动程序 ①提取酶液 ②滴加酶液 ③恒温处理(注意保温温度和时间);式中：为淀粉酶水解淀粉生成的麦芽糖量(在标准曲线上查得，)；′为淀粉酶的对照管中的麦芽糖量()；为比色时所用样品液体积()；为酶促反应时间()。 特别提醒 需将提取的一部分酶液进行灭活处理，即取一部分上清液在沸水中水浴加热，使其中的酶失活，以备对照。 原理：过氧化氢酶可以催化分解为水和氧，其反应如下：;如果在反应系统中加入适当过量的过氧化氢溶液，经过酶促反应后，在酸性条件下，用标准高锰酸钾溶液滴定多余的，反应如下： ＋＋―→＋＋＋ 根据消耗的的量计算出过氧化氢酶的活力。 酶活力用每克鲜重样品 内分解的毫克数表示。; 下列关于过氧化氢及过氧化氢酶的叙述中，不正确的是 (　　)。 ．过氧化氢可被过氧化氢酶水解 ．过氧化氢能被无机催化剂分解 ．过氧化氢酶的催化效率比无机催化剂高 ．过氧化氢酶在强酸性环境中活力最高 解析　过氧化氢酶及等无机催化剂都能将过氧化氢分解成水和氧气。酶的催化具有高效性，即比无机催化剂的催化效率高许多倍。酶的催化一般要在较温和的条件下进行，高温、强酸、强碱条件下都不适于酶的催化。 答案　; 加工橘子罐头，采用酸碱处理脱去中果皮(橘络)，会产生严重污染。目前使用酶解法去除橘络，可减少污染。下列生长在特定环境中的类微生物，不能大量产生所用酶的是 (　　)。 ．生长在麦麸上的黑曲霉 ．生长在酸奶中的乳酸菌 ．生长在棉籽壳上的平菇 ．生长在木屑上的木霉;思维导图：; 下图的实验装置用于研究温度对凝乳酶催化乳汁凝聚的影响。先将酶和乳汁分别放在支试管中，然后将这支试管放入同一温度的水中水浴 ，再将酶和乳汁倒入同一试管中混合，保温并记录凝乳所需要的时间。通过多次实验并记录在不同温度下凝乳所需要的时间。结果如下表所示。据此实验，请判断下列叙述中正确的是 (　　)。;装置;思维导图：;探究性实验是指实验者在不知晓实验结果的前提下，通过自己实验、探索、分析、研究得出结论，从而形成科学概念的一种认知活动；实验假设一般采用“如果，则”的形式表达，是根据现有的科学理论、事实，对所要研究的对象设想出一种或几种可能性的答案、解释；实验现象未知，对应实验目的，作出探究实验结论。 验证