酶母细胞自噬相关分子机制的初步探究-生理学专业毕业论文.docxVIP

南开大学学位论文原创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师指导下进行研究工作所 南开大学学位论文原创性声明 本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师指导下进行研究工作所 取得的研究成果。除文中已经注明引用的内容外，本学位论文的研究成果不包 含任何他人创作的、已公开发表或者没有公开发表的作品的内容。对本论文所 涉及的研究工作做出贡献的其他个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本 学位论文原创性声明的法律责任由本人承担。 学位论文作者签名： 王漫燕 2011年5月30 Et 非公开学位论文标注说明 根据南开大学有关规定，非公开学位论文须经指导教师同意、作者本人申 请和相关部门批准方能标注。未经批准的均为公开学位论文，公开学位论文本 说明为空白。 论文题目 申请密级 口限制(≤2年) 口秘密(≤10年) 口机密(≤20年) 保密期限 20 年 月 日至20 年 月 日 审批表编号 批准日期 20 年 月 日 限制★2年(最长2年，可少于2年) 秘密★10年(最长5年，可少于5年) 机密★20年(最长10年，可少于10年) 摘要摘要 摘要 摘要 细胞自噬(Autophagy)是真核生物中高度保守的、对维持真核生物健康起 关键作用的一类亚细胞降解途径。自二十世纪九十年代初在酵母中展开了相关 基因的筛选和细胞生物学的研究以来，其分子机制的研究已取得了很大进展， 酵母也成为了细胞自噬分子机制研究最为充分的模式生物。同时哺乳动物中细 胞自噬的研究也越来越受到关注，已有很多证据表明细胞自噬在生物体生长发 育、免疫防御、细胞程序性死亡、肿瘤发生发展、退行性神经病变抑制等方面 有非常重要的作用。 本论文主要研究Atgl4、At98的分子机制，二者都是酵母细胞自噬的中心 机制蛋白，其中At914是III型P13K复合物I的组分，负责将整个复合物定位 于PAS(phagopbore assembly site)位点，该位点是自噬体形成的起始位点。 本论文研究发现在氮饥饿条件下，酵母细胞中Atgl4的蛋白表达会明显上升， 与此同时ATGl4的mRNA水平也有明显上升，说明引起ATGl4表达变化的原因发 生在转录水平。通过筛选潜在的转录调控因子，我们发现Gln3、Gzf3是ATGl4 表达的正调控因子。然后我们通过构建低量表达Atgl4的菌株来研究表达量对 细胞自噬的作用，结果表明，在实验条件下，表达量的上升对细胞自噬的发生 不是必须的。 At98是一种泛素样蛋白，其与PE结合，在自噬体形成过程中，被募集到PAS， 位于双层膜结构的两侧，调控它的延伸。当自噬体形成之后，大部分At98从双 层膜上解离回到细胞质。其到达PAS的数量可以调控自噬体的大小，是细胞自 噬至关重要的一个蛋白。本论文研究发现，At98在细胞质与自噬体膜之间的正 常循环是细胞自噬必须的，At98滞留于自噬体膜上会明显影响整个自噬体的形 成过程。研究还发现，At92-Atgl8复合体在At98的循环中也起到重要作用，Atgl 的激酶活性是At98从自噬体解离的关键信号。另外还发现，At98对At99的循 环影响不大。 综上所述，本论文主要研究了细胞自噬分子机制的相关关键点，为进一步 研究自噬体形成的分子机制提供一定参考。 关键词：细胞自噬Atgl4 At98分子机制 I AbstractAbstract Abstract Abstract Autophagy is a highly conserved subce]lular degradation pathway in eukaryotes． It has a critical role to maintain organism health．The research about autophagy molecule machinery has achieved significant progress since the discovery of autophagy related genes in yeast in early 90s．As a research model，yeast has been the most thoroughly investigated organism．Meanwhile，autophagy in mammalian model systems is getting ever-increasing interests，as autophagy has important roles in development，immune defense，programmed cell death,tumor suppression and progression，an