门静脉压力与其血管内皮细胞功能关系的研究-外科学(普外)专业毕业论文.docxVIP

墅苎杰墼丛燮娄型型丝墼燮型塑门静脉压力与其血管内皮细胞功能关系的研究 墅苎杰墼丛燮娄型型丝墼燮型塑 门静脉压力与其血管内皮细胞功能关系的研究 华中科技大学露济医学院骥属耀济医院 博士研究生 张形 导 师 杨镇教授 中文摘要 r (匝登壶鸯鏖(portal hypertension,P}疆)是戳fj静赫系统壅藐蚕蠡应誊异常交佬 为特点，以脾肿大、脾功能亢进、食管胃底静脉曲张、呕觑、漂便、腹水等为主 要临庶表现的～种症侯群。长期以来，发病机制一直悬门静脉浅压症研究中的～ 个重要方嚣，势已形成三糖主要学说嚣：“后嬲囊滚规划”、“瓣趣斑浚规划”以 及“滚递裙覆灌论”，璇在又有了新豹“蛊管病交学说”。对发瘸辊铡研究豹重褫 是为了从椴本上了解门静脉压力升高的原因，以便对主要因素实施干预，i是到治 疗目的。 现已认识到门静脉阻力和fl静脉瞧流量增加是形戏门嫁裹压瓣痰理生理基 础，隧力增攘跫始发嚣索，高巍滚鬟是维掩fj脉压力持续升高瓣重要戮素，蘸向 往血流是门脓阻力增商达一定程度后所引起的病理生璞现象。而门静脉血流阻力 包括器质性和功能性两方面因素，其中功能性隰力是由于局部盥管活性物质水平 变化，特别是绒血管物质水平增加版致。近年来研究发埂走皮源蛙敷管涯投物质 一袋纯嚣(nitric oxi斌NO)移凑瘦素(endothelin，ET)分别与门静脉裔汪肉麓离 动力循环和门脉功能性阻力增高有密留关系，偶对二者在门静脉高压时的产生和 作用的部位与机制在某些方面还未达成共识。 随赣对血管内皮细胞功能研究豹进展，使得对其分泌功毙障碍灼规理鸯了深 入熬认识。研究发瑷，滁了内毒素鞠一些缨藏戮子辨，斑滚流动对斑营内皮细稳 所产生耱祝械力(势仞力、压力和牵张力)对赢管内皮细胞的形态和各稀功能均 有煎要影响。在高斑压和其他～些血管性疾病的发病机制中国内外对此已有研 究，丽对门静脉高压症尚未见相关报道。 型墼 型墼 !幽曼罂塑塑婴婴翘墨墨型 由于零张力是由动脉搏动所产生，因此门静脉系统内皮细胞主要感受的机械 力必剪切力和压力，嚣幽予f3势脉糍压症对血滚动力学变化各异，在不闫癜捌及 不满部位懿门脉盘流方海、速度不黼，函既门静脉离压症簿门踩系统蠹凌缭胞所 承受的剪切力变化实际上疑难以确定的。但在任何情况下，门脉系统血管内皮细 胞所承受的压力增高是肯定的，由此我们假设各种肝病引起肝内血流阻力增加， 使门静脉系统援力升毫，露后翥导致的内戏细慰功糍紊瓤、局部内发源性虫管溪 ^， 性锈震失衡，怒门静脉薅噩症发病税翻中静一个重要缓成帮分。y ， 我们对晒床门静脉高鹾症患者和外伤性脾破裂患者脾静脉内皮细胞表达肉 皮索l(ET．1)、内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase、eNOS) 及细胞内信号传导物质蛋自激酶C(protein kinase C，PKC)、转黎因子核因子 kappa转(nuclear factor kappa B，NF-KB)传免疫缀纯染色积稷标免疫荧光激光搦 描荚聚焦显微镜检测，阉时为了尽W能减少箕他因素的影响，我们还制作门静脉 部分结扎的大鼠模型，对其门静脉律相同研究。另外，我们通过对体外加压培养 条俅下人脐静脉内皮细腮拣ECV304形态、结构和分泌磐簦活性鼠孑(ET-1、 NO)功悲黪变化进行磅究，掇讨l：=|鐾熬区蠡的增毫怼弱帮蠹疫源拣盘管活性秘 质分泌静影螭及可能的分子杭箭，缓翳为临床药物撩制门静脉高压癍提供理论依 据。 本磅突分二郏分： 第一部分： eNOS、ET-I、PKC、NF-r,B在门静脉高压 血管内皮细胞的表达及意义 目的：磅究门势舷惑压对其悫管内瘦细腿eNOS、ET-1、PKC、N狂RB豹 表达t探讨fj静赫局部舂皮深性斑管活饿物质异常与内皮缅脆应力信号转导通路 激活的关系。 f 《方法：用免疫组化和免疫荧光激光扫描共聚焦显微镜技术检测门静脉高鹾症 患者脾静脉和门静黥毫盛大鼠模型fl势歇内皮缨戆eNOS、ET。1、PKC、NF-rJ3 暇学媾士论交 暇学媾士论交 门静棘压力与其龃霄内厦壤抛功{i毪巍糸鼢斜魏 的表达，探讨门静脉高服时其m管内皮细胞eNOS、ET，1表达改变与信息分子 PKC、NF-KB静关系。 结果：PKC的阳性袭达见于细胞的胞浆、胞膜。门静脉高聪患者脾静脉和 实验组大鼠模型门静脉内皮细胞PKC表达呈阳性或强阳性，其啦管平滑肌细胞 瞧冒霓掰经蓑号。对照绫裂呈疑健蕺弱掰性表达。圈豫分辑对照缝平均啜毙凌为 O+0257±O．0082(人)／0．0224±0．0065(鼠)，实验缀为O．0682±0．0092(人)／0．0593 ±O．0057(鼠)，麓异有非常显著性(P殇o．01)。eNOS、ET-I与NF-v．B双重免疫 荧光标记的激光手j接共聚焦显微镜检测最示荧