抗旱基因LEA的克隆及其序列解析-植物学专业毕业论文.docxVIP

摘 摘 要 水资源短缺已经成为一个严重的生态问题，我国的水危害尤为严重。研 究植物的抗旱机理，运用分子生物学的方法克隆抗旱基因，培育耐旱物种是 开发利用盐碱地和干旱地的有效途径，获得有自主知识产权的抗旱基因尤为 重要。研究表明，植物能够通过信号传递、渗透调节、代谢调整、脱水保护 等多种机制适应干旱胁迫，与其相关的基因相继被克隆应用于生产实践。其 中脱水保护受到了很大的关注，其原因在于在超出渗透调节范围时，LEA蛋 白及糖类等脱水保护物质在植物中的积累有利于保护生物大分子，尤其是膜 系统免受破坏。LEA因其特殊的结构可作为脱水保护剂，也可作为调节蛋白， 分子伴侣参与植物渗透调节，因而LEA蛋白的抗旱功能备受瞩目。徐德平把 大麦的俐翻，基因(LEA第三组)转入水稻中得到了很好的抗旱效果，这进 一步证实了其抗脱水胁迫的功能。 本论文从LEA第三组基因入手，克隆了两个第三组LEA基因。一方面， 参照国外报道几种植物的第三组LEA中的H瑚，基因的相对保守的氨基酸序 列，设计并合成一对兼并引物，提取抗旱、耐盐性强的羊草的DNA．采用PCR 技术．扩增出了495bp的一段基因片段。扩增产物经纯化后直接克隆到 PMDl8-T载体系统中，经PCR及酶切法鉴定，所得的重组质粒中含有495 b P的片段。测序结果表明所克隆的该段DNA序列与国外所报道的植物的该段 DNA的核苷酸序列及氨基酸序列的同源性