香蕉乙醇脱氢酶基因的克隆及其逆境胁迫表达.pdf

中国农学通报 2014,30(7): 109-115 Chinese Agricultural Science Bulletin 香蕉乙醇脱氢酶基因的克隆及其逆境胁迫表达 1 2 1 1 1 1 1 1 贾彩红 ，金志强 ，王绍华 ，王 卓 ，苗红霞 ，刘菊华 ，张建斌 ，徐碧玉 1 2 （中国热带农业科学院热带生物技术研究所，海口571101；中国热带农业科学院海口实验站，海口570102） 摘 要：香蕉乙醇脱氢酶基因的克隆及在逆境胁迫下的表达分析，将为进一步研究ADH 在香蕉中的功能 奠定基础。本研究从香蕉果实抑制差减文库中获得一条香蕉乙醇脱氢酶基因片段，采用RACE 技术获 得其全长，命名为MaADH 。MaADH 的cDNA 全长1140 bp ，编码379 个氨基酸。生物信息学分析该基 因编码的蛋白分子量为40.7 kDa ，等电点为7.09。保守结构域分析发现，该基因具有MDR 保守结构域， 包含22 个NAD 结合位点、11 个底物结合位点和4 个锌结合位点。系统进化树分析表明，MaADH 与拟 南芥和甘蓝亲缘关系较近。MaADH 在盐胁迫和低温胁迫处理的香蕉苗中上调表达；在干旱胁迫下该 基因是先上调表达，随后下调表达；在伤害胁迫下是先下调表达后上调表达，但变化不明显。研究说明， 香蕉中的乙醇脱氢酶基因在香蕉适应盐、低温、干旱和伤害等逆境中发挥重要的作用。 关键词：香蕉；乙醇脱氢酶；序列分析；逆境胁迫；表达分析 中图分类号：S668.1 文献标志码：A 论文编号：2013-2007 CloningandExpressionAnalysisofMaADHinBananaUnderEnvironmentalStress 1 2 1 1 JiaCaihong,JinZhiqiang,WangShaohua,WangZhuo, MiaoHongxia,LiuJuhua ,ZhangJianbin,XuBiyu1 1 1 1 (InstituteofTropicalBioscienceandBiotechnology,ChineseAcademyofTropicalAgriculturalScience,Haikou571101;1 2HaikouExperimentalStation,ChineseAcademyofTropicalAgriculturalScience,Haikou570102) Abstract: Thecloningandexpressionanalysisofbananaethanoldehydrogenasegeneunderadversitystress werelaidthefoundationforfurtherresearchthe ADH functioninbanana.Thecloningofan ADH cDNA, designatedas MaADH,wasisolatedfrombananafruitbysuppressionsubtractivehybridization(SSH)and gainedbyRACEtechnique.ThecDNAwas 1140bpinlength,codingfor 379aminoacidresidues.Predicted bybioinformaticsanalysis,itsproteinmolecularweightwas 40.7 KDa,isoelectricpoint 7.09.Byconserved domainanalysis,thege