米槁精油对镰刀菌的抑制作用及化学成分研究-中药学专业毕业论文.docxVIP

贵阳中医学院硕士学位论文5．2试验内容与方法 贵阳中医学院硕士学位论文 5．2试验内容与方法 ．42 5．3结果与分析 -42 5．4{寸论 48 全文总结与展望 49 参考文献 52 附录一文献综述 ··54 附录二8个馏分的GC．MS分析结果 一 ··63 致 谢 ··79 个人简历 80 万方数据 贵阳中医学院硕士学位论文摘要 贵阳中医学院硕士学位论文 摘要 本文以米槁精油为研究对象对其进行提取、分离及成分分析。以天麻镰刀菌 和半夏镰刀菌为供试菌，采用生长速率法测定米槁精油及其8个馏分对两种菌的 抑菌活性，筛选出最佳的抑菌馏分，研究其化学组成，从而确定米槁精油中的抑 菌成分。研究结果如下： 1．采用水蒸气蒸馏法提取米槁精油，其提取率为(5．10-a：0．12)％(v／w)。 对其进行GC．MS分析，其主要成分有1，8．桉叶素(21．69％)、(+)．匙叶桉油烯 醇(8．50％)、a．松油醇(7．05％)、石竹烯氧化物(6．75％)、榄香醇(6．17％) 等。 2．以天麻镰刀菌和半夏镰刀菌为供试菌，测定了米槁精油的抑菌活性。结 果表明，米槁精油对两种菌均表现出不同程度的抑制作用，并且抑制作用均随着 浓度的增加而增强。同时测定了米槁精油对两种菌的毒力，其对天麻镰刀菌和半 夏镰刀菌的ECso分别为25．81 mL／L和6．68 mL／L，表明米槁精油对半夏镰刀茵 的抑制作用较强。 3．采用分子蒸馏法对米槁精油进行粗分离，在不同蒸馏条件下，得到了8 个馏分，分别为1．1、1．2、1．3、1-4、2．1、2．2、3．1和3．2，其得率分别为15．92％、 12．26％、15．21％、32．45％、14．27％、81．91％、9．74％和88．57％，证实了分子蒸 馏产品收率高的特点。并采用GC．MS联用仪对8个馏分进行成分分析，结果表 明，利用分子蒸馏，通过改变蒸馏温度和真空度，使得米槁精油中的化学组分分 段富集，得到了不同的馏分，为其活性成分的筛选奠定了基础。 4．以天麻镰刀菌和半夏镰刀菌为供试菌，测定了8个馏分的抑菌活性。结 果表明，8个馏分在浓度为200 mI，／I，时，均对两种菌有抑制作用。以抑制率为 衡量指标，该浓度下的8个馏分对天麻镰刀菌的抑菌活性高低排序为：1．3 (96．22％)2．1(81．44．％)3．1(79．09％)1-2(77．56％)1-4(74．98％) 2-2(72．74％)1．1(71．39％)3．2(70．17％)；该浓度下的8个馏分对半 夏镰刀菌的抑菌活性高低排序为：2．2(98．02％)3．2(97．81％)1-4(97．59％) 2．1(97．36％)3—1(96．27％)1．3(94．07％)1-2(92．31％)1．1(91．21％)。 并筛选出1．3为最佳抑菌馏分，进一步测定了1．3对两种菌的毒力，l一3对天麻 万方数据 贵阳中医学院硕士学位论文镰刀菌和半夏镰刀菌的ECso分别为48．96 贵阳中医学院硕士学位论文 镰刀菌和半夏镰刀菌的ECso分别为48．96 mL／L和8．99 mL／L，即1．3对半夏镰刀 菌具有显著地抑制作用。 5．以天麻镰刀菌和半夏镰刀菌为供试菌，测定了1．3中主要化学成分l，8． 桉叶素和柠檬烯的抑菌活性和毒力。结果表明，1，8．桉叶素和柠檬烯均对两种菌 有抑制作用，两种化学成分是米槁精油中的抑菌成分。同时，1，8．桉叶素对天麻 镰刀菌和半夏镰刀茵的ECso分别为50．08 mL／L和33．92 mL／L，表明1，8．桉叶素 对半夏镰刀菌的抑制作用强。柠檬烯对天麻镰刀菌和半夏镰刀菌的ECso分别为 53．30 mL／L和40．04 mL／L，表明柠檬烯对半夏镰刀菌的抑制作用较强。综上所述， 1，8．桉叶素对两种菌的抑制作用较强。 通过研究表明，米槁精油对天麻镰刀菌和半夏镰刀菌均有较好的抑制作用， 且其抑菌作用是多种抑菌成分协同作用的结果。而l，8．桉叶素和柠檬烯只是其中 的两种抑茵成分，因此可开发米槁精油作为植物源杀菌剂的来源，以发现更多的 抑茵成分，从而为植物源杀菌剂的开发提供参考。 关键词：生长速率法，抑菌活性，EC50，GC．MS分析 万方数据 贵阳中医学院硕士学位论文Abstract 贵阳中医学院硕士学位论文 Abstract nle essential oil of migao was the objective and it Was extracted and analyzed． The antibacterial activitives of migao’S essential oil and 8 fractions on Tianma Fusarium and Pinellia Fusarium were determined by