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　　鹅膏菌多肽毒素在生命科学研究中的应用 　　张志光 　　张晓元 　　李东屏 　　摘要 　　鹅膏菌多肽毒素是野生毒磨菇产生的主要毒素，常引起人和动物的中毒与死亡。 　　由于鹅膏毒肽对真核细胞的聚合酶Ⅱ具有专一性抑制作用以及鬼笔毒肽对肌动蛋白具有束缚作用，它们在生命科学研究中具有重要的应用价值，并对生命科学的发展产生了很大的促进作用。 　　本文拟综述鹅膏毒肽和鬼笔毒肽在生命科学中应用的研究进展。 　　关键词 　　鹅膏菌属 　　鹅膏毒肽 　　鬼笔毒肽 　　生命科学 　　中图分类号 　　9962 　　94998 　　,, 　　,410081, 　　Ⅱ, 　　,,, 　　人误食有毒的鹅膏菌后，产生腹泻、腹痛、呕吐、幻觉、昏迷等多种症状，致死率相当高。 　　在19世纪60年代后，就已对鹅膏菌的毒性成份进行研究，到本世纪80年代已分离纯化鉴定的鹅膏菌毒素包括鹅膏毒肽、鬼笔毒肽、毒伞素、毒蝇碱、异恶唑衍生物、鹅膏氨酸以及、等[1,2]鹅膏毒肽是一类双环八肽，天然的鹅膏毒肽包括α-鹅膏毒肽α-,又译为鹅膏菌碱。 　　β-鹅膏毒肽β-、-鹅膏毒肽、ε-鹅膏毒肽、三羟鹅膏毒肽、三羟鹅膏毒肽酰胺、二羟鹅膏毒肽酰胺、二羟鹅膏毒肽羧酸、和二羟鹅膏毒肽酰胺原九种。 　　鬼笔毒肽是一类双环七肽、天然的鬼笔毒肽包括二羟鬼笔毒肽、一羟鬼笔毒肽、三羟鬼笔毒肽、一羟鬼笔毒肽原、羧基一羟鬼笔毒肽、羧基二羟鬼笔毒肽、羟基三羟鬼笔毒肽七种。 　　毒伞素是一类单环七肽，其天然毒性成分有6种。 　　在鹅膏菌毒素中，引致人和动物死亡的主要为,50小白鼠一般为02——05,从人中毒事件分析，人的50则更低[3]属于慢作用毒素，一般中毒后5——12天死亡，死亡率高达90,而为快作用毒素。 　　动物腹腔毒性试验，在2——4引致死亡，50为15——40[4]的毒性及机理和相似。 　　在鹅膏菌多肽毒素的研究过程中，由于发现了α-对真核生物聚合酶Ⅱ的专一性抑制作用和对肌动蛋白的专一性束缚作用，从而推动了分子生物学、细胞生物学、发育生物学、医学生物学等学科的发展。 　　反过来，由于这些学科的实验研究中对和及其衍生物的应用也不断地促进和丰富了对鹅膏菌多肽毒素的研究和应用。 　　鹅膏菌多肽毒素的化学结构、性质、毒理等已由和进行了综述与评论[1,5]本文拟对鹅膏菌多肽毒素主要为和在生命科学研究中的应用进行综述。 　　1 　　真核细胞合成的专一性抑制剂 　　自α-被分离纯化后，其毒性机理经过十多年的研究，直到等人观察到中毒的小白鼠肝细胞的核仁碎裂，并且发现细胞核中含量持续减少[6],鹅膏毒肽作用的分子机理才得以逐步揭示出来。 　　体外或体内由处理的鼠肝细胞核的合成被严重阻断，认为抑制聚合酶的活性[7]和1969发现10的α-抑制了体外的依赖于的聚合酶活性[8]由于和1969成功地从海胆胚胎中分离出三种聚合酶，并且从鼠肝中分离出两种聚合酶Ⅰ和Ⅱ，以后又分离第Ⅲ种[9],随即，确定了α-低至5——10的浓度是抑制了海胆、鼠肝和小牛胸腺的聚合酶Ⅱ的活性，而对聚合酶Ⅰ不起作用[10,11],并且也发现聚合酶Ⅲ对α-也敏感，但其被抑制的浓度为聚合酶Ⅱ的103——104倍高浓度[12]和进一步揭示出[13],对聚合酶Ⅱ的抑制是非竞争性抑制型，它们是阻止聚合酶Ⅱ在一磷酸二酯键形成后与新生沿模板的移位，它们和聚合酶Ⅱ、模板与新生的形成稳定的四元复合物，因为在α-鹅膏毒肽存在时，聚合酶仍能合成二核苷酸。 　　对线粒体内的聚合酶浓度高达40[13]、叶绿体内的聚合酶浓度高达100[13]以及原核生物的聚合酶没有抑制作用[14,15]不同真核生物的聚合酶Ⅱ对α-的敏感程度有很大的差异，一般是进化越高级的生物则其被抑制的程度越高。 　　哺乳动物的细胞、以及鱼和昆虫的聚合酶Ⅱ对α-高度敏感，其抑制常数为3×10-9——5×10-8[16——19],植物的聚合酶Ⅱ的较动物的高些[20,21]而一般的真菌的聚合酶Ⅱ的较植物高10到几百倍[22——24]在鹅膏菌属中，含与不含的种间的聚合酶Ⅱ对α-的是有悬殊差异的[25],等报道含有的和的子实体的聚合酶Ⅱ的分别为20×10-3和33×10-3,而不聚积的和的分别为10×10-5和98×10-6[26],这说明自身含有的鹅膏菌对有很高的抗性。 　　这些研究表明在应用抑制真核生物的生物合成时，要根据不同的物种的具体情况而定。 　　2 　　基因的组织结构和细胞定位 　　低浓度的抑制真核生物聚合酶Ⅱ的活 　　性，高浓度的一般能抑制聚合酶Ⅲ的活性，而对聚合酶Ⅰ无作用。 　　的这一特性使之成为一类非常有用的生物试剂，它们与聚合酶Ⅰ的专一性抑制剂放线菌素[27,28]、聚合酶Ⅲ的专一性抑制剂以及蛋白质合成的抑制剂放线菌酮等一起研究真核细胞基因的结构组织、功能与表达及调控。 　　应用聚合酶对α-