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;;一、研究培养基对微生物的选择作用;;;2.选择培养基
(1)概念:允许 种类的微生物生长,同时 其他种类微生物生长的培养基。
(2)举例:筛选土壤中分解尿素的细菌的选择培养基是以 为唯一氮源,按物理性质归类为固体培养基。;;答案 碳源是葡萄糖,氮源是尿素。;答案 增设牛肉膏蛋白胨基础培养基并进行涂布平板操作,如果牛肉膏蛋白胨培养基上的菌落数明显多于选择培养基上的菌落数,则说明选择培养基的确起到了筛选能分解尿素的细菌的作用。;归纳总结 ;;解析 全营养牛肉膏蛋白胨培养基常用于大肠杆菌的培养,该培养基对微生物无选择作用,A项错误。
抗盐突变菌株具有耐高盐的能力,因此可以利用高NaCl的选择培养基进行选择培养,B项正确。
分解尿素的菌株会分解尿素形成氨,使培养基pH升高,因此可以利用含酚红的尿素培养基筛选鉴别??分解尿素的菌株,C项正确。
利用高温条件可以筛选耐热的Taq细菌,D项正确。;;解析 由题知,该培养基成分中含有水、无机盐、氮源,但不含含碳有机物,可用来培养自养型微生物,选项A、B均对;
圆褐固氮菌同化类型为异养型,培养基中必须存在含碳有机物,所以该培养基不能用来培养圆褐固氮菌,C错。 ;;;;(4)计算公式:每克样品中的菌株数=(C÷V)×M,其中C代表某一稀释度下平板上生长的 ,V代表涂布平板时所用的 ,M代表 。
2.设置对照
(1)对照实验:是指除了 以外,其他条件都相同的实验。
(2)主要目的:排除实验组中 对实验结果的影响,提高实验结果的可信度。例如,为了确认培养基是否被杂菌污染,需以不进行接种的培养基培养作为空白对照。;3.实验操作流程
(1)土壤取样
①取样原因:土壤有“微生物的 ”之称,同其他生物环境相比,土壤中的微生物数量 ,种类 。
②土壤要求:富含 ,pH接近 且潮湿。
③取样部位:距地表约 的土壤层。
(2)样品稀释
①稀释原因:样品的 直接影响平板上生长的 。
②稀释标准:选用一定稀释范围的样品液进行培养,以保证获得菌落数在 之间,便于计数。;(3)微生物的培养与观察
①培养:根据不同微生物的需要,控制适宜的培养 和培养时间。
②观察
a.观察方法:每隔24 h统计一次菌落数目,最后选取菌落数目稳定时的记录作为结果。
b.菌落的特征:包括菌落的 、 、隆起程度和 等。
(4)菌种鉴定
①原理:细菌合成的 将尿素分解成氨,使培养基的 增强。
②方法:以尿素为唯一氮源的培养基中加入 指示剂,培养某种细菌后,若指示剂变 ,可初步鉴定该种细菌能够分解尿素。;4.操作提示
(1)无菌操作
①取土样的用具在使用前都需要 。
②实验操作均应在 进行。
(2)做好标记:本实验使用的平板和试管比较多,为避免混淆,使用前应标明培养基的 、 以及平板上培养样品的 等。
(3)制定计划:对于耗时较长的生物实验,要事先制定计划,以便提高_________。;;答案 不真实。为增加实验的说服力与准确性,应设置重复实验,在同一稀释度下涂布3个平板,统计结果后计算平均值。;答案 不合理。微生物计数时,如果实验中出现重复实验的结果不一致的情况,应分析实验过程中可能的影响因素,找出差异的原因,而不能简单地舍弃后进行计数。;答案 105的稀释度下取0.1 mL涂布的三个平板上的菌落数在30~300之间,计算其平均值为(212+234+287)/3≈244。进一步可以换算出1 g样品中活菌数为(244÷0.1)×105=2.44×108。;答案 当两个或多个细菌连在一起时,平板上观察到的只是一个菌落。;答案 可能是他选择的土壤样品不同于其他同学;也可能是培养基受到了污染或操作失误。;答案 ①其他同学用与A同学一样的土样进行实验,如果结果与A同学一致,则证明A同学操作无误;如果结果不同,证明A同学存在操作失误或培养基的配制有问题;
②将A同学配制的培养基在不加土样的情况下培养作为空白对照,以判断
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