高考生物二轮复习生物化学与分子生物学技术实践名师公开课市级获奖课件（江苏专用）.pptxVIP

第四章　生物化学与分子生物学技术实践章末整合提升知识系统构建规律方法整合热点考题集训内容索引知识系统构建法医农业技术萃取必背要语1.分离与测定生物成分中蛋白质的技术包括离心沉降法、薄膜透析法、凝胶色谱法和电泳法等。2.离心沉降法是通过控制离心速度，使分子大小、密度不同的蛋白质发生沉降分层，从而达到分离出不同种类蛋白质的目的。3.薄膜透析法是利用蛋白质分子不能透过半透膜的特性，使蛋白质与其他小分子化合物分离开。4.凝胶色谱法是根据蛋白质分子量的大小差异对其进行有效分离的方法。5.芳香油挥发性强、易溶于有机溶剂，因此可以采用蒸馏法、萃取法、压榨法等进行提取。水蒸气蒸馏法是植物芳香油提取的常用方法。对于不适于蒸馏的原料可以采用萃取法。6.PCR扩增过程中要进行无菌操作，避免污染，且向离心管中加入模板DNA、引物和4种脱氧核苷酸以及TaqDNA聚合酶。7.变性是在94 ℃高温下使模板双链DNA解旋。8.退火是将反应体系温度降至55 ℃，使引物与模板DNA链配对。9.延伸是将反应体系温度回升至72 ℃左右，在TaqDNA聚合酶作用下，使引物链延伸，形成互补的DNA双链。10.DNA分子的测定：DNA分子＋二苯胺试剂 蓝色物质。规律方法整合1.薄膜透析法(1)破碎细胞方法：研磨与超声波结合的方法。(2)血红蛋白的释放：使红细胞破裂释放血红蛋白。(3)透析目的：除去样品中的小分子杂质。原理：透析袋能使小分子自由进出，而将大分子保留在袋内。2.离心沉降法离心沉降法也是纯化蛋白质的一种方法，它通过控制离心速率，使得分子大小、密度不同的蛋白质发生沉降分层，从而达到分离出不同种类蛋白质的目的。整合一　蛋白质的分离与纯化3.醋酸纤维薄膜电泳法(1)原理：不同的物质在同一电场中的泳动速度不同。(2)影响因素：泳动速度主要取决于带电颗粒的性质，即颗粒的大小、形状和所带净电荷的多少。一般来说，带电颗粒直径越小，越接近于球形，所带净电荷越多，则在电场中的泳动速度越快；反之，则越慢。此外，电场强度、溶液的pH等因素对泳动速度也有影响。(3)优点：简单、快速、分离清晰、灵敏度高、样品用量少、没有吸附现象、电泳后区带界限清晰等优点。4.凝胶色谱法根据蛋白质分子量的大小差异对其进行有效分离的方法。(1)相对分子量不同的蛋白质通过凝胶时，相对分子量较小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道，路程较长，移动速度较慢。(2)相对分子量较大的蛋白质无法进入凝胶内部的通道，只能在凝胶外部移动，路程较短，移动速度较快。相对分子质量不同的蛋白质分子因此得以分离。例1　试回答下列“蛋白质提取与分离实验”的有关问题：(1)为了提取和分离血红蛋白，首先对红细胞进行洗涤以去除杂质蛋白，洗涤时应使用生理盐水而不使用蒸馏水的原因是 。防止红细胞吸水破裂答案(2)若要去除血清蛋白中的小分子杂质，采用图1装置。透析液是 ，一段时间后，若向烧杯中加入双缩脲试剂，透析袋内溶液是否出现紫色？并说明判断的依据：_____________________________________________ 。(磷酸)缓冲液出现紫色。双缩脲试剂可以透过半透膜，与袋内血清蛋白反应，生成紫色物质答案(3)图2、图3分别表示电泳法分离蛋白质和纸层析法分离叶绿体中色素的结果。不同蛋白质得以分离是因为_________________________________ ；不同色素得以分离是因为_____ 。不同蛋白质所带电荷性质、分子大小和形状不同，导致电泳时迁移速度不同不同色素在层析液中溶解度不同，导致层析时扩散速度不同答案1.植物芳香油的提取方法有蒸馏法、压榨法和萃取法等。2.水蒸气蒸馏法是植物芳香油提取的常用方法，它的原理是利用水蒸气将挥发性较强的植物芳香油携带出来。整合二　提取芳香油的方法例2　下列关于植物芳香油提取方法的叙述，正确的是A.提取植物芳香油利用蒸馏法出油率最高B.出油率的高低完全取决于采用的方法C.各种芳香油的提取都适合用蒸馏法D.提取植物芳香油具体采用哪种方法要根据原料的特点来决定解析答案解析　植物芳香油的提取方法有蒸馏法、压榨法、萃取法等，具体采用哪种方法，要根据植物原料的特性来决定。挥发性强，并在蒸馏过程中有效成分不被破坏的宜用蒸馏法提取；挥发性较差的，受热时有效成分易分解的宜用萃取法；原料易焦糊的宜用压榨法提取。出油率的高低不仅与提取方法有关，而且与实验过程的操作、原料的处理等方面有关，因此A、B项错误。水蒸气蒸馏法，由于设备简单，操作容易，是提取植物芳香油的常用方法，但不是所有芳香油的提取都适合用此法，因此C项错误。1.PCR的原理(1)变性：当温度上升到94 ℃时，双链DNA解旋为单链(如下图)。整合三　PCR技术(2)退火：系统温度下降至55 ℃左右时，两种引物通过碱基互补配对原则与两条单链D