黄芪白芍复配抗氧化协同特性的研究-农产品加工及贮藏专业毕业论文.docxVIP

2．4．4提取物的抗氧化能力测定 2．4．4提取物的抗氧化能力测定 16 2．4．5提取物多酚黄酮含量的测定 17 2．4．6样品的物质基础鉴定分析 18 2．4．7 HPLC．DPPH法对样品的抗氧化组筛选 ．．18 2．4．8样品对H202诱导MRC一5细胞氧化损伤的保护作用 ．．19 2．4．9样品对H202引起细胞损伤的修复作用 ．20 2．4．10样品对体外培养细胞SOD、GSH．Px和CAT活性及MDA含量的影响 ．21 2．4．11细胞的分型SOD活性测定 21 2．4．12细胞的GSH．Px活性测定 22 2．4．13细胞的CAT活性测定 23 2．4．14细胞的MDA含量的测定 24 2．4．15油脂抗氧化实验 24 2．5统计分析 25 3结果与分析 一26 3，1黄芪、白芍单药和药对清除DPPH自由基能力 26 3．2黄芪白芍药对的总酚黄酮含量 26 3．3黄芪、白芍各极性分部之间复配活性 27 3．3．1复配样品DPPH自由基清除能力 ．27 3．3．2复配样品总酚和黄酮含量分析 28 3．4硅胶柱层析分离所得复配样品活性分析 29 3．4．1硅胶柱层析分离所得复配样品DPPH自由基清除能力 ．29 3．4．2硅胶柱层析分离所得复配样品总还原能力 ．30 3．4．3硅胶柱层析分离所得复配样品总酚和黄酮含量 31 3．4．4样品中总酚含量增长、黄酮含量增长与样品抗氧化活性协同作用的相关性 31 3．5样品的物质基础鉴定分析 32 3．5．1高效液相色谱(HPLC)条件的确定 32 3．5．2 E1的主要抗氧化物质的筛选 33 3．6复配样品对H202诱导的MRC一5细胞氧化损伤的保护和修复作用 ．36 3．6．1复配样品对H202诱导的MRC．5细胞氧化损伤的保护作用 ．．36 3．6．2样品对H202引起细胞损伤的修复作用 38 万方数据 3．6．3提取物对体外培养细胞分型SOD、GSH．Px、CAT活性和MDA含量的影响 3．6．3提取物对体外培养细胞分型SOD、GSH．Px、CAT活性和MDA含量的影响 ．38 3．7样品抗油脂氧化能力分析 39 4讨论 42 4．1黄芪白芍复配抗氧化有效成分组的筛选 42 4．2黄芪白芍复配抗氧化有效成分组成分分析 42 4．3黄芪白芍复配抗氧化有效成分组对H202诱导的MRC．5细胞氧化损伤的保护和修复 作用分析 ．．43 4．4黄芪白芍复配抗氧化有效成分组的抗油脂氧化中应用 45 5结论 46 参考文献 ．．47 致谢 54 攻读学位期间发表论文及研究成果情况 ．．55 万方数据 山东农业大学硕士学位论文中文摘要 山东农业大学硕士学位论文 中文摘要 我国中药资源丰富，是天然抗氧化物的重要来源，己引起国内外研究者的广泛重视， 目前许多研究发现中草药的药理作用与其抗氧化活性成分有关。据文献记载黄芪、白芍 具有良好的抗氧化特性，经卫生部批准可用于功能食品。 本课题组研究发现，在单药剂量减半配对时，药对清除自由基能力较两种单药的理 论加和值显著提高，部分药对清除自由基能力甚至超过单药，表现出良好的协同增效效 应。这表明可通过中药配伍，在较低单药剂量条件下获得更好的抗氧化活性，同时降低 原料成本。因此，本研究通过分析白芍、黄芪药对在配伍前后物质基础的变化规律，初 步明确药对配伍过程中抗氧化能力的协同增效机制，找到一组具有良好协同增效效应的 抗氧化成分。本研究对于阐明中药配伍的增效机理具有重要的理论价值，在开发与氧化 胁迫相关的功能食品和获得新型复合抗氧化剂等方面具有重要的应用前景。主要研究结 果如下： 1、利用不同溶剂萃取及柱层析的方法对白芍、黄芪主要抗氧化成分进行初步分离纯化 及配伍前后抗氧化性能评估，通过对不同溶剂萃取片段进行活性检测发现白芍乙酸乙酯 段为重要的活性片段，通过硅胶柱层析对其进行进一步分离，筛选出配伍后抗氧化能力 增效最好的有效成分组。 2、采用HPLC．DPPH方法分析黄芪白芍配伍前后抗氧化成分的变化，筛选出8种抗氧 化成分，利用HPLC．DAD—MS／MS方法鉴定出其中的7种，分别为羟基芍药苷、儿茶素、 毛蕊异黄酮．7．O．8．D．吡喃葡萄糖苷、芒柄花素．7．O．D—D一吡喃葡萄糖苷、9，10．二甲氧基 紫檀烷．3一O—B．D一吡喃葡萄糖苷、2’一羟基．3’，4-二甲氧基异黄烷 7 O p．D．葡萄糖苷、槲皮 素。 3、通过MTT试验，细胞中SOD、GSH．Px、CAT活性测定和MDA含量测定，研究抗 氧化能力增效最好的有效成分组对H202诱导的MRC．5细胞氧化损伤的保护和修复作 用，实验结果发现抗氧化成分组对H202导致的MRC．5细胞氧化损伤具有一定的协同保 护和修复作用，在诱导Cu／Zn．SOD、CAT活性及抑制MD