第十五章分离分析法导论3.pptVIP

* 第四节 色谱定性和定量的方法 * 第四节色谱定性和定量的方法－定性分析 一、与标样对照的方法（保留值定性） 1.利用纯物质定性 2. 利用加入法定性 作出未知样品的色谱图，然后在未知样品加入某已知物，又得到一个色谱图。峰高增加的组分即可能为这种已知物。 * 第四节 色谱定性和定量分析 二、利用保留指数法定性 保留指数又称为Kováts指数，也是一种相对保留值，它表示物质在固定液上的保留行为，是目前使用最广泛并被国际公认的定性指标。它具有重现性好、标准统一、温度系数小等优点。 测定方法： 以正构烷烃作为标准，规定其保留指数为100Z， Z为分子中碳原子个数（如正己烷的保留指数为600）。其它物质的保留指数（IX）是通过选定两个相邻的正构烷烃（分别具有Z和Z＋1个碳原子） 来确定。 * 第四节 色谱定性和定量分析 被测物质X的调整保留时间应在相邻两个正构烷烃的调整保留值之间。 计算所得的IX值，通过与文献值对照进行定性分析。 * 第四节 色谱定性和定量分析 保留指数仅与固定相的性质、柱温有关，与其它实验条件无关。其准确度（误差?5％）和重现性都很好。只要柱温与固定相相同，就可应用文献值进行鉴定，而不必用纯物质相对照。 * 第四节 色谱定性和定量的方法 三、与其他方法结合定性 色谱-质谱联用（GC-MS、LC-MS）；色谱-红外联用； 组分的结构鉴定 Sample Sample 5890 1.0 DEG/MIN HEWLETT PACKARD HEWLETT PACKARD 5972A Mass Selective Detector D C B A A B C D Gas Chromatograph (GC) Mass Spectrometer (MS) Separation Identification B A C D * 第四节 色谱定性和定量的方法 四、定量分析 任务：测定混合样品中各组分的百分含量。 依据：操作条件一定时，被测组分的量（mi）与检测器给出的响应信号（峰面积Ai或峰高hi）成正比。 mi = fi ? Ai fi为被测组分i的校正因子。 进行色谱定量分析时需要： （1）准确测量检测器的响应信号— 峰面积或峰高； （2）准确求得比例常数 — 校正因子； （3）正确选择合适的定量计算方法，将测得的峰面积或峰高换算为组分的百分含量。 * 第四节 色谱定性和定量分析 （一）峰面积的测量： 峰面积测量的准确与否直接影响定量结果。对于不同峰形的色谱峰采用不同的测量方法。 （1）对称形峰面积的测量—— 峰高乘以半峰宽法 A = 1.065 ? h ?W1/2 （2）不对称形峰面积的测量—— 峰高乘平均峰宽法 对于不对称峰的测量采用峰高乘平均峰宽法： A = 1/2 ? h（W0.15 + W0.85） W0.15 和 W0.85分别为峰高0.15倍和0.85倍处的峰宽。 （3）自动积分和微机处理法 * 第四节 色谱定性和定量分析 （二）校正因子 峰面积的大小不仅取决于组分的质量，还与它的性质有关。即当两个质量相同的不同组分在相同条件下使用同一检测器进行测定时，所得的峰面积却不相同。 故不能直接利用峰面积计算物质的含量。 为了使峰面积能真实反映出物质的质量，就要引入校正因子，对峰面积进行校正， * 第四节 色谱定性和定量分析 fi = mi / Ai fi值为单位面积对应的物质量，与组分i质量绝对值成正比，称为绝对校正因子。定量校正因子与检测器响应值成倒数关系：f i = 1 / Si 要精确求出fi值比较困难。一方面由于精确测量绝对进样量困难；另一方面峰面积与色谱条件有关，要保持测定fi值时的色谱条件相同。 在实际工作中，使用相对校正因子。 * 第四节 色谱定性和定量分析 相对校正因子 fi? = fi / fs 即某组分i的相对校正因子fi?为组分i与标准物质s的绝对校正因子之比。 通过相对校正因子，可以把各个组分的峰面积分别换算成与其质量相等的标准物质的峰面积。 * 第四节 色谱定性和定量分析 组分和标准物质以质量表示，所得校正因子称为质量校正因子；若以摩尔表示，称为摩尔校正因子；对于气体分析，也有体积校正因子。 相对校正因子与组分和标准物的性质以及检测器的类型有关，与操作条件无关。 当无法得到标准物时，也可以使用文献值。通常，用分别用苯（TCD），庚烷（FID）作标准。