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补体溶血实验报告(共4篇) 　　实验三补体溶血实验　　一、实验目的：了解溶血反应的原理，掌握溶血反应的基本操作方法　　二、实验原理：将绵羊红细胞做抗原注射家兔体内，经一定潜伏期，家兔血清中即出现特异　　性抗体，此种抗体称溶血素，它可以与绵羊红细胞结合，此时若加入补体，即可激活补体的　　经典途径，则呈现溶血现象。　　三、实验材料　　1、溶血素作为指示剂，来判定媒质中有无游离的补体，近而推定媒质中未知抗原和已知抗体是否进行了特异性的结合。本反应具有很高的敏感性及特异性，因之常应用于传染病的诊断，特别诊断病毒疾病和梅毒。　　由于参与本反应的各种成分间有着一定量的关系，因此在作本试验之前，必须通过一系列的预备实验来确定各成分的使用量，故本反应的实验方法较为复杂。　　本次实验以伤寒杆菌免疫血清与其相对应的抗原补体结合试验为例。材料：　　1.抗原：伤寒的抽出液2.抗体：伤寒杆菌的免疫血清3.补体：豚鼠血清　　4.溶血素：抗绵羊血细胞的兔血清5.2%绵羊红血球　　6.小试管、试管架、水浴锅。方法：　　预备试验　　预备试验包括溶血素效价的滴定，补体效价的滴定，抗原效价的滴定及被检血清的处理。　　溶血素效价的滴定按照下表加入各物　　凡最高稀释度的溶血素可呈现完全溶血者为一个单位。依上表结果第10管毫升溶血素为一个单位，在溶血反应中常用毫升中含有2个溶血素单位的溶液，所以试验时应取1：XX倍稀释的溶液。　　补体单位滴定　　能引起完全溶血的最小补体量称为准确单位，上表中第3管，但因补体的效价可能有部分损失，故普通稍高的一管为实用单位，实际试验时须用两个实用单位。　　上表的结果为：补体标准单位：毫升补体实用单位：毫升补体两个实用单位：毫升　　因试验时是两个实用单位的补体毫升，可依下列比例关系换算：20：=ⅹ：ⅹ=　　即须将补体稀释倍，用毫升则含有两个实用单位。抗原的滴定　　在用已知抗原测定未知抗体时，必须先滴定抗原效价以决定本试验时所需抗原的最适　　如血清对照管呈完全或部分不溶血是为抗补体现象。血清严重污染细菌，混有淋巴液或显著溶血时，常产生很强抗外体作用。又如试管、吸管不清洁，也可出现抗补体。若有抗补体发生，应抽血重试验。　　补体的溶血反应　　原理：　　当红细胞与相应抗体相结合，在电解质存在时，可使红细胞产生凝集现象；若同时加入新鲜动物血清，则血清中的补体可与红细胞及其抗体形成的免疫复合物结合，从而激活补体导致红细胞溶解，产生溶血现象　　材料　　1、抗原：2%绵羊红细胞。　　2、抗体：溶血素。　　3、补体，新鲜豚鼠血清。　　4、生理盐水。　　5、小试管、刻度吸管、试管架、37℃水溶箱等。　　步骤　　1、取小试管3支，编号后按下表加入各物管号2%红血球溶血素(2单位)补体(2单位)生理盐水1　　2　　-3-　　2、将试管摇匀后置37℃水箱内：15—30分钟，取出观察有无溶血现象；　　结果观察　　管底无血球沉淀，液体红色透明管为溶血。　　注意事项　　不要摇荡试管，红细胞离开机体是很容易破裂的。　　加样一定要精确，不要漏加　　附件13级护理本科补体溶血反应实验物品采购(转载于:写论文网:)及具体安排。　　级护理本科班人数分别为62、64人实验课时2学时实验分组，每班分12组，每组5-6人　　2.实验材料请购：　　1.绵羊血红细胞10ml稀释成2%溶液　　2.绵羊红细胞抗体50ml　　3.豚鼠每班4只，共8只　　4.生理盐水10瓶　　5．5ml小试管每班36管，加示教6只，共82管　　实验一补体结合实验　　实验原理：补体无特异性，可与任何抗体抗原复合物结合而被激活，但不能与单独的抗体或抗体结合。　　补体结合试验是一种有补体参与，以绵羊红细胞和溶血素作为指示系统的抗原抗体反应体系。绵羊红细胞与溶血素结合后可激活补体，导致红细胞破坏，出现溶血现象。参与补体结合反应的五种成分可分为两个系统：(1)待测系统，已知抗原、待测抗体；指示系统，SRBC、溶血素。待检测系统与补体作用后，加入指示系统，若不出现溶血，表示待测系统中的抗原抗体相对应；两者特异性结合形成抗原抗体复合物结合并消耗了补体，无游离的补体与指示系统结合，故不溶血，为补体结合试验阳性。反之，若出现溶血，则为补体结合试验阴性。　　实验方法：　　1.取五支试管，依次做好标记，放在试管架中。　　2.按照下表加样。　　实验结果：　　结果分析：试管1、5没有发生溶血现象，为补体结合试验阳性，说明其中的抗体抗原发生了特异性结合，消耗了补体；试管2、3、4发生溶血现象，为补体结合试验阴性，说明抗体抗原不对应，没有消耗补体。　　1.羊血用前轻轻摇匀，避免剧烈正当引起溶血。　　2.各种试剂的吸管不要混用。