抗角质蛋白抗体和抗天然Ⅱ型胶原抗体联合检测在类风湿关节炎诊断中的临床意义-免疫学专业毕业论文.docxVIP

抗角质蛋白抗体和抗天然Ⅱ型胶原抗体联合检测 抗角质蛋白抗体和抗天然Ⅱ型胶原抗体联合检测 在类风湿关节炎诊断中的临床意义 摘 要 目的：本研究通过比较两种不同来源的抗原片对血清 抗角质蛋白抗体(AKA)的检测结果，探讨适合临床广泛 应用的AKA检测手段，同时联合检测血清中的抗NC lI． 抗体和类风湿因子(RF)，了解这些抗体在类风湿性关节 炎早期诊断中的价值及联合检测的临床意义，使患者能够 得到早期诊断、早期治疗。 f方法：1．将所有入选病人分为四组：典型RA、早期 RA、非RA、健康对照组，同期采集血清标本。2．自制 AKA抗原片：取6周龄雄性Wismr大鼠食道中1／3，立即 ．70。C冰冻储存备用。实验前将食道横切为4urn厚的冰冻 切片干燥后低温保存。3．检测血清中的AKA抗体：分别 以自制抗原片和德国欧盟公司试剂盒中的抗原片为底物， 用欧盟公司提供的FITC标记的羊抗人IgG抗体为二抗， 用间接免疫荧光法检测典型RA、早期RA、非RA及健康 对照组四组血清中的IgG—AKA。4．用酶联免疫吸附法 (ELISA法)检测四组血清中的抗一NCII抗体。5．用乳胶 凝聚法测定RF、CRP，采用人工计数测定ESR、PLT。5． 通过手和腕关节正位x线片的分期了解骨侵蚀性。6．数 据的统计学处理应用SAS(6．12)软件包进行分析。差异 显著性检验应用X2检验，组间比较用Kruskal．Wallis Test(Chi—Square Approximation)秩和检验，相关分析用 KENDALL等级相关分析，P0．05或P0．01有显著性差异。 KENDALL等级相关分析，P0．05或P0．01有显著性 差异。 结果：所检测标本中，自制抗原片和欧盟公司抗原片 AKA阳性率均为27．5％，非特异性荧光出现率分别为 17．5％和15．O％，经x2检验两种抗原片在阳性率和非特异 性荧光出现率方面均无统计学差异(P0．05)2对比Even 氏蓝复染与否对AKA结果的影响，复染前后阳性率分别 为25．8％和27．5％，非特异性荧光出现率分别为16．7％和 15．o％，复染后阳性率稍增高，非特异性荧光出现率略减 低，但经X2检验二者均无统计学差异(pO．05)3．采用欧 盟公司试剂盒，检测四组样本的IgG—AKA阳性率分别为 46．7％、53．3％、6．6％和3-3％，RA组明显高于对照组， 经统计学处理具有非常显著差异(p0．001)；其敏感性为 50．0％，特异性为95．0％，；早期RA阳性率与典型RA无 统计学差异(P0．05)。4．四组样本抗．NC II抗体阳性率分 别为36．7％、 26．7％、6．6％和0．0％，RA组阳性率明显 高于疾病对照组和健康对照组， 经统计学处理具有非常 显著差异(p0．001)；敏感性为3 1．7％，特异性为96．7％， 但早期RA阳性率低于典型RA，二者无统计学差异。5．RF 阳性的RA中，AKA和抗NC—II抗体阳性率分别为54．8％ 和31．7％，约有1／3的RF阴性患者AKA阳性和抗．NC II 抗体阳性，RF与AKA或抗NC．II抗体同时阳性诊断的敏 感性为38．3％和21．7％，特异性均为96．7％，但RF与AKA 和抗．NC II抗体均无相关性；两种被检抗体同时阳性时特 异性可达1 00％。6．随着抗体阳性数目的增加， 患者表现 为ESR增快、CRP增高、血小板计数增多、骨侵蚀严重； 抗体阳性数目在x线分期、PLT方面，组间比较有显著差 抗体阳性数目在x线分期、PLT方面，组间比较有显著差 异，在发病年龄、病程、ESR、CRP等临床资料方面均无 显著差异尸 结论：本研究采用自制抗原片检测血清中的 IgG—AKA，结果与外购抗原片无显著差晃f抗原制备取材 容易、稳定性好，较为经济实用，适合临床应用。Even 氏蓝复染可减少非特异性荧光干扰，但复染与否在统计学 上无显著差异，有经验的医师可不经复染准确判断结果≯7 在-ge检测抗体中，RF敏感性最高(68．3％)，特异性最 低(85．0％)，IgG—AKA对RA诊断敏感性、特异性均较 高，尤其对早期、不典型、RF阴性者更具临床诊断价值。卜JL一 抗一NC II抗体可见于RA早期，但少数与软骨、骨破坏有 关的其它风湿病也可出现低滴度该抗体阳性，故抗．NC II 抗体不能单独用于RA早期诊断，必须结合临床症状、RF 或IgG—AKA检测综合判断；约I／3RF阴性患者IgG．AKA 和抗。NC II抗体阳性，故通过检测这几种抗体可减少RF 阴性患者的漏诊率，提高对RA的早期诊断率；且这两种 抗体与疾病活动性、严重性密切相关，二者相结合为判断 预后并制定合理治疗方案提供有力依据。 关键词：抗角质蛋白抗体。抗天然II型胶原抗体。