铝胁迫下大豆柠檬酸分泌机理研究初探-植物营养学专业毕业论文.docxVIP

摘 摘 要 已知PI 416937为大豆耐铝(AI)基因型。本实验结果再次证实，A1胁迫条 件下，大豆耐Al基因型PI 416937的耐Al机制之一是通过大量分泌柠檬酸而表 现耐Al特性，且12小时内，柠檬酸的分泌量随Al浓度(10～50 uM)的提高 而增加。当柠檬酸分泌受抑制后，大豆地上部表现出明显的受胁迫现象。 A9C、DIDs及PG均为常用的阴离子通道抑制剂，在本实验中用来探讨Al 胁迫下大豆耐Al基因型的柠檬酸分泌机制。不同浓度的同一种抑制剂对柠檬酸 分泌的影响可能不同，所以各设浓度梯度。其中A9C强烈抑制AI诱导的柠檬酸 的分泌，12小时内，10、20、30“MA9C均完全抑制了Al胁迫下柠檬酸的分泌； PG并不抑制Al诱导的柠檬酸分泌，5，10，20，30”MPG对Al诱导的柠檬酸 分泌均无明显影响；DIDS不能抑制Al诱导的柠檬酸分泌，5，10，20，30“M DIDS 对Al诱导的柠檬酸分泌无明显影响。诅l十10¨MA9C，oAl+10肛M PG及．AI+10 HM DIDS处理，在12小时的处理时间内，均未检测出柠檬酸的分泌。结果表 明，Al诱导开启大豆根系细胞膜上柠檬酸可通过的阴离子通道，而实现柠檬酸 的大量分泌；且三种抑制剂对同一种阴离子通道的抑制效果不同。 已知ABA为重要的逆境信号物质，也为调控保卫细胞膜上S．型阴离子通道 的物质。本实验中，12小时内，．AI+5ABA，．AI+10ABA及．AI+15ABA处理， 均未检测出柠檬酸的分泌，而在+AI+5ABA处理中，柠檬酸的分泌量与+A1处理 相比，增加近一倍。ABA明显激发了Al诱导的柠檬酸的分泌。因而推测ABA 是联系A1胁迫和有机酸分泌之间的可能信号物质，但这一结论尚需进一步研究 证实。 柠檬酸合成于线粒体内，因而其通过线粒体膜外运过程对于最后的分泌有很 大影响。已知柠檬酸载体定位于线粒体膜上；Mersal、PP和PITC为已知的柠檬 酸载体抑制剂，其中Mersal专一作用于半胱氨酸的SH基，而PP和PITC则专 一作用于赖氨酸。抑制剂浓度不同，抑制效果可能不同，所以各设浓度梯度。本 实验中，12小时内，Mersal能明显抑制A1诱导柠檬酸的分泌，而不同浓度的 Mersal对Al诱导柠檬酸分泌的影响不同：+Al+5Mersal和+Al+10 Mersal处理均 能明显抑制柠檬酸的分泌，而+AI+15Mersal处理却使柠檬酸分泌量增加，且达 到了+A】处理柠檬酸分泌量的水平，说明高浓度的Mersal引起细胞膜的部分伤 害，从而导致柠檬酸的外漏；PP对Al诱导分泌柠檬酸无明显的影响，l、5、10 u M PP对Al诱导的柠檬酸分泌无明显影响，且浓度处理问差异不显著；12小 骨内，．At+10越MMersal和．AI+10#MPP楚理申均未硷测毒柠檬骏麓分泌：P疆C对大豆幼苗的毒害作用可能较大，实验过程中发现，有Al无A1处理中PITC均 骨内，．At+10越MMersal和．AI+10#MPP楚理申均未硷测毒柠檬骏麓分泌：P疆C 对大豆幼苗的毒害作用可能较大，实验过程中发现，有Al无A1处理中PITC均 ；i起大豆地上部萎蔫，麓而PITC馋为柠檬酸载体橱制削的意义不大，本实验务 件下还不能简单地对PITC的抑制效果作出判断。三种柠檬酸载体抑制荆申 Mersal有效抑制柠檬酸的分泌，表明定位于线粒体膜上的柠檬酸载体可能在AI 诱导的柠檬酸大量分泌过程中起重要伟席，且半胱氨黢可能包含于粹礞酸载体 中。 本安验中，稃檬酸的测定采用RP。HPLC汝，能这裂较为璎惩鼗分辑溅定效 袋。 关键词：大豆耐AI基因磐；AI胁迫；硝离子通道抑制弁lj；柠檬酸载体抑制荆 The The preliminary study on the mechanism of citrate secretion from soybean(Glycine max L1 under Al stress Abs仃act It is well known that PI 4 1 69347 is all A1·tolerant soybean genotype．In our experiment results．it is further estimated that A1．induced citrate secretion iS one ofthe most important A1．tolerant mechanisms in soybean．During the 12 hour Al treatment period．the amount of citrate secretion increases with increasing concentration of Al (0-5