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酪蛋白的制备实验报告 　　酪蛋白的制备　　一、目的　　1、学习从牛奶中制备酪蛋白的原理和方法。　　2、掌握等电点沉淀法提取蛋白质的方法。　　二、原理　　牛乳中的主要的蛋白质是酪蛋白，含量约为35g/L。酪蛋白是一些含磷蛋白质的混合物，等电点为。利用等电点时溶解度最低的原理，将牛乳的pH调至时，酪蛋白就沉淀出来。用乙醇洗涤沉淀物，除去脂类杂质后便可得到纯酪蛋白。　　三、材料、试剂与器具　　材料　　新鲜牛奶　　试剂　　1、95%乙醇1200mL　　2、无水乙醚1200mL3、/L醋酸——醋酸钠缓冲液300ml先配A液与B液　　A液：/L醋酸钠溶液称NaAC·3H2O，定容至XXml。B液：/L醋酸溶液，称优纯醋酸定容至1000ml。　　取A液1770ml，B液1230ml混合即得的醋酸——醋酸钠缓冲液3000ml。　　4、乙醇——乙醚混合液　　乙醇：乙醚=1：1　　器具　　1、离心机2、抽滤装置　　3、精密pH试纸或酸度计4、电炉　　5、烧杯6、温度计　　四、操作步骤　　酪蛋白的粗提　　100mL牛奶加热至40℃。在搅拌下慢慢加入预热至40℃、的醋酸缓冲液100mL.用精密pH试纸或酸度计调pH至。　　将上述悬浮液冷却至室温。离心15分钟。弃去清液，得酪蛋白粗制品。　　酪蛋白的纯化　　1、用水洗涤沉淀3次，离心10分钟，弃去上清液。　　2、在沉淀中加入30mL乙醇，搅拌片刻，将全部悬浊液转移至布氏漏斗中抽滤。用乙醇—乙醚混合液洗沉淀2次。最后用乙醚洗沉淀2次，抽干。　　3、将沉淀摊开在表面上，风干；得酪蛋白纯品。　　准确称重，计算含量和得率。　　含量：酪蛋白g/100mL牛乳　　式中理论含量为/100mL牛乳。　　五、注意事项　　1、由于本法是应用等电点沉淀法来制备蛋白质，故调节牛奶液的等电点一定要准确。最好用酸度计测定。　　2、精制过程用乙醚是挥发性、有毒的有机溶剂，最好在通风橱内操作。　　3、目前市面上出售的牛奶是经加工的奶制品，不是纯净牛奶，所以计算时应按产品的相应指标计算。　　六、实验报告　　1、根据实际操作，以流程图形式总结酪蛋的制备方法。　　2、合理分析实验所得率　　七、思考题　　1、制备高产率纯酪蛋白的关键是什么？　　2、试设计另一种提取酪蛋白的方法？　　实验四酪蛋白的制备　　一、实验目的　　1、学习从牛奶中制备酪蛋白的原理和方法。　　2、掌握等电点沉淀法提取蛋白质的方法。　　二、实验原理　　牛乳中的主要的蛋白质是酪蛋白，含量约为35g/L。酪蛋白是一些含磷蛋白质的混合物，等电点为。利用等电点时溶解度最低的原理，将牛乳的pH调至时，酪蛋白就沉淀出来。用乙醇洗涤沉淀物，除去脂类杂质后便可得到纯酪蛋白。　　三、材料、试剂与仪器　　1.材料　　新鲜牛奶　　2.试剂　　95%乙醇1200mL　　无水乙醚1200mL　　/L醋酸—醋酸钠缓冲液300ml先配A液与B液　　A液：/L醋酸钠溶液称NaAC·3H2O，定容至XXml。　　B液：/L醋酸溶液，称优纯醋酸定容至1000ml。取A液1770ml，B液1230ml混合即得的醋酸——醋酸钠缓冲液3000ml。　　乙醇—乙醚混合液乙醇：乙醚=1：1　　3.仪器　　离心机、抽滤装置、精密pH试纸或酸度计、电炉、烧杯、温度计　　四、操作步骤　　1.酪蛋白的粗提　　100mL牛奶加热至40℃。在搅拌下慢慢加入预热至40℃、的醋酸缓冲液100mL.用精密pH试纸或酸度计调pH至。将上述悬浮液冷却至室温。离心15分钟。弃去清液，得酪蛋白粗制品。　　2.酪蛋白的纯化　　用水洗涤沉淀3次，离心10分钟，弃去上清液。　　在沉淀中加入30mL乙醇，搅拌片刻，将全部悬浊液转移至布氏漏斗中抽滤。用乙醇—乙醚混合液洗沉淀2次。最后用乙醚洗沉淀2次，抽干。　　将沉淀摊开在表面上，风干；得酪蛋白纯品。　　3.准确称重，计算含量和得率。　　含量：酪蛋白g/100mL牛乳　　五、实验结果及分析式中理论含量为/100mL牛乳。　　六、思考题　　1、制备高产率纯酪蛋白的关键是什么？　　实验四、酪蛋白的制备　　一、目的　　1、学习从牛奶中制备酪蛋白的原理和方法。2、掌握等电点沉淀法提取蛋白质的方法。二、原理　　牛乳中的主要的蛋白质是酪蛋白，含量约为35g/L。酪蛋白是一些含磷蛋白质的混合物，等电点为。利用等电点时溶解度最低的原理，将牛乳的pH调至时，酪蛋白就沉淀出来。用乙醇洗涤沉淀物，除去脂类杂质后便可得到纯酪蛋白。三、材料、试剂与器具材料新鲜牛奶试(转载于:写论文网:酪蛋白的制备实验报告)剂　　1、95%乙醇1200mL2、无水乙醚1200mL3、/L醋酸——醋酸