罗哌卡因硬膜外阻滞对T细胞亚群、NK细胞及免疫球蛋白的影响-麻醉学专业毕业论文.docxVIP

中文摘要 中文摘要 前 言 ，’机体的免疫系统不是孤立地存在和行使其功能，而是与神经 和内分泌系统紧密地联系在一起，在通过特定的免疫机制调节内 环境稳定的细胞上同时也表达有对神经和内分泌系统调节起作用 的分子受体，以至于有现代的神经免疫内分泌学概念。因此，神经 和内分泌系统受到外界干扰发生变化不可避免地影响免疫系统功 能，尤其是敏感的特异性免疫系统。 围手术期间紧张、焦虑、药物、手术创伤、麻醉等因素对人体免 疫系统的干扰在引起感染率增加，肿瘤复发等方面已经受到人们 重视。目前的研究多集中在观察不同的麻醉方法对减轻手术应激 引起的免疫抑制的作用等方面，而对于硬膜外阻滞本身在无手术 应激的情况下对机体免疫系统的影响报道很少。j f 目 的 观察在无手术应激的情况下应用罗哌卡因硬膜外阻滞对机体 T淋巴细胞亚群、NK(natural killer)细胞及血清免疫球蛋白IgG、 IgA、IgM的影响。 《材料与方法 选择需要硬膜外麻醉下行膀胱及下肢手术的患者45例，随机 分为三组：H组，高浓度局麻药(1．0％罗哌卡因)组；L组，低浓度 局麻药(0．5％罗哌卡因)组；N组，对照组，只给以试验剂量和相 同容量的生理盐水。三组病例子进入手术室前30分钟肌注咪唑 安定501山g／kg、阿托品101LLg／kg。入室后连接监护仪连续监测 ·1· ECG、HR、BP、SPO：，建立静脉通路。左侧卧位下选择12一b闻 ECG、HR、BP、SPO：，建立静脉通路。左侧卧位下选择12一b闻 隙直入法行硬貘外穿麴，成功麓放置连续疆貘羚寻管，{霉卧位。诱 导前给予试验剂量1。0％利多卡因5ml，如舞人血及脊麻症状则3 分钟后分两次间隔5分钟按分组情况给予规定浓度罗哌卡因或生 理釜承勰菇，每3分镑尾赞刺法溺定阻滋平匿直到瘸觉孚覆稳 定，阻滞平面上界I8一T10，下界S3一S5。严重低血压给予麻黄碱 10—15rag，心动过缓给予阿托晶0．3—0．5rag。三组病镪l均在给予 试验量蓊(阻滋懿，鼍)，阻滞乎蕊稳定(对照经壤据鬏实验取平均 值13．5士4．8rain)聪(阻滞后)30、60、90分钟(T，．T2、T3)取外周 静脉血备两份：一份1．5ml，EDTA抗凝；～份4ml，3000转／分离心 5分钟艨取盘清2ml，置于一80℃低温冰箱中保存待测。 T缁胞亚群【CD；、cDf、eDf、(CD；+CD；)／(CD；+CD；) 及NK细胞(CD，：+撕)的测量：用清洁微吸头取EDTA抗凝血100ul 小心加入标记好的冬装有20tzl双色直标免疫荧光试粼(Simuhest IMK—Lymphocyte)的试管底部，混合反应∞分铮，然爝每个试管 再加入1 X浓度的溶血剂2ml混匀放置暗处12分钟(不能超过12 分钟)，鞘液洗涤后2500转／分离心lO分钟，去上清后加入0．5ml 固定滚(1。o％多聚攀醛)充分滋匀2～8。C放置碴处镣上撬溺定。 免疫球蛋白测定：(1)标准曲线的制备：将标有IgG、IgA、IgM 含量的工作标准先用0．5ml蒸馏水溶解，稃用生理盐水稀释成五 耪浓度的标准滚。裁备IgG、l萨标准夔线致以上各浓度标准滚 10出，制备IgM取20一分别翻入各单扩板前五孔，置水平湿盒放 37℃恒瀣培养箱内，48小时后观察结果，用卡尺测量扩散环的直 径。纵轴力lg含黧乘以4，横轴必扩散琢的赢径，将五赢连线即为 标准魏线。(2)样潞测定：取德测血清0。lml加0．3ml生理盐承混 匀，测IgG、IgA各墩10出，测IgM取20一分别注入各囱单扩散板 孔中，暨水平湿盒放37。C恒温培养箱爽，48小时后用卡尺测量扩 散环的麓径，瑟哥麸所对应标准艟线率_查麓薛廷静含童。 ·2· 统计学分棱：掰凑数据髑均数±标准麓表示，组内毖较采用配 统计学分棱：掰凑数据髑均数±标准麓表示，组内毖较采用配 对t擒验，组鲟院较采雳单嚣豢方差分毒厅，P0+05认为有显著链 差异。 缝 票 T细胞亚群的变化：H组在阻滞后兄、T3时点与1、l比较，CD， 秘(CD；+cDf)／(CD；÷CO；)值显著升离(P(o．05)，阻滞爱T； 时点与薯；穗受：秃鼗著交辱{：(pO．05)，L缀在疆辫詹各爵赢变化 趋势与H组相同，但与阻滞前比较无显瓣漩异(P0．05)；H组绎H L组比较阻滞震备时点变化值均无显著差异(P0．05)；H组秘 L缓cD；、￡霹褒辍滞蘩薏无显著变纯；N缓零缨鼹泛嚣在”戳 滞”前爝均无显著变化(PO．05)；NK细胞的变化：H缀和L组在 阻滞后T{、T3聪点与TI比较，NK细胞显瓣降低(P《0。05)，阻滞 磊趸对点与t翔}艺无显著变馋《Po．05)，N缓疆游嚣售醣点鹣 无显著变化(PO。05)；H缀和L组与N缀比较，阻潞后T2、E时 点差异盟著(P《0．05)，阻滞餍T4时