南华大学医学院临床检验基础课件 第一章.ppt

（一）检验申请单 应包括患者最基本的信息，以识别患者和经授权的申请者，同时应提供相关的临床信息。相关的临床信息至少包括姓名、性别、年龄，以用于解读检验结果。 二、血液标本采集的过程要求 （二）标本采集和处理的具体要求 血液标本可通过检验申请单溯源到特定的个体，实验室不应接收或处理缺少标识的检验申请单和标本。 （三）标本信息完整性与接收 （一）饮食和生理状态 三、血液标本采集及检测结果的影响因素 （二）药物 药物干扰检验结果主要有4条途径： ①影响待测成分的物理性质。 ②参与检验过程的化学反应。 ③影响机体组织器官生理功能和（或） 细胞活动中的物质代谢。 ④对机体器官的药理活性和毒性作用。 （三）采血操作 1．采血时间 2．采血部位 3．采血时体位　 4．压脉带的使用 （四）其他 1．输液 2．溶血 3．某些抗凝剂对标本影响 4．低温保存对标本的影响 * 假设HCT为0.50 外周血涂片检查是最有益的血液系统疾病检查手段，能为临床提供大量的信息。 因此，血涂片制备和染色的质量直接影响血细胞形态的检验结果。 一张合格的血涂片应该是厚薄适宜，血膜头、体、尾分明，分布均匀，两侧留有一定的空隙，边缘整齐。 第三节 血涂片制备与染色 新载玻片常有游离碱质，应用铬酸清洗液或10%盐酸浸泡24h，然后再彻底清洗。 已用过的载玻片可在含有适量肥皂水或合成洗涤剂的水中煮沸20min，用热水将肥皂和血膜洗去，再用自来水反复冲洗，擦干或烤干后备用。 一、血涂片制备 （一）载玻片要求:使用的载玻片要有很好的清洁度。 1．手工推片法 （1）薄血膜推片法：临床常用的方法，主要用于观察血细胞形态及仪器法检测结果异常的复查。 （二）血涂片制备方法 取新鲜血液1滴于载玻片的中央，用推片的一角将血滴由内向外旋转涂布，制成厚薄均匀、直径约1.5cm的圆形血膜，待自然干燥后，滴加数滴蒸馏水，使红细胞溶解，脱去血红蛋白，倾去水，血涂片干燥后即可染色并用显微镜检查。 本方法特别适合检查疟原虫、微丝蚴等。 （2）厚血膜涂片法： 目前有许多型号的自动血液分析仪，配备有血涂片仪和染色仪，可以按照检验人员的指令执行自动送片、取血、推片、标记和染色等任务。 2．自动涂片法 【方法学评价】良好的血涂片是血细胞形态学检查的前提 【质量保证】 血涂片质量问题及可能的原因 （一）染料 1．碱性染料、酸性染料和复合染料 1．Wright染色法 （1）染色原理 1）物理吸附与化学亲和作用：血涂片染色过程既有物理吸附作用，又有化学亲和作用。由于血细胞内不同结构所含有的化学成分不同，对各种染料的亲和力也不同。 （二）染色方法 2）pH值的影响：血细胞多种成分属于蛋白质，由于蛋白质系两性电解质，所带电荷随着溶液的pH而定。因此，血细胞染色对氢离子浓度十分敏感。 染色时常用缓冲液（pH6.4～6.8）来调节染色时的pH值，以达到满意的染色效果。 （2）试剂 1）Wright染液： Wright染液是由伊红和亚甲蓝溶解于甲醇而成。 甲醇的作用：①溶解伊红和亚甲蓝。 ②具有很强的脱水作用，可以固 定红细胞形态，提高对染料的 吸附作用，增强染色效果。 2）磷酸盐缓冲液（pH 6.8） （3）染色方法与结果判断 （1）染色原理：与Wright染色法基本相同。Giemsa染色法加强了天青的作用，提高了噻嗪类染料的效果。 （2）试剂：染液放置越久，其染色效果越好。 （3）染色: 2．Giemsa染色法 Wright-Giemsa染色法结合了Wright染色法和Giemsa染色法的优点。在Wright染液配方的基础上，每1.0g Wright染料添加0.3g Giemsa染料。 染色步骤与Wright染色法相同。 3．Wright-Giemsa染色法 【方法学评价】 染色过深、过浅与血涂片中: 细胞数量、血膜厚度、染色时间、染液浓度、pH密切相关。 【质量保证】 Wright染色的质量保证 血涂片染色不佳的原因及纠正措施 一、血液标本类型 皮肤采血法 静脉采血法 动脉采血法。 二、血液标本采集方法 按采集部位可分为 主要用于需要微量血液的检验项目和婴幼儿血常规检验。皮肤采血法所获得的血液标本是微动脉血、微静脉血和毛细血管血混合的末梢全血。 （一）皮肤采血法 1．采血针皮肤采血法 （1）器材准备 （2