罗哌卡因对GABA激活膜电流影响的研究-麻醉学专业毕业论文.docxVIP

The research on ropivacaine affect GABA-activatrd membrane current A Dissertation Submitted to Shihezi University In Partial Fulfillment of the Requirements for the Degree of Master of Medicine By Yang Yue (Anesthesiology) Dissertation Supervisor: Prof. Si Jun-qiang June, 2013 I 目 录 中文摘要…………………………………………………………………………………… Ⅳ 英文摘要…………………………………………………………………………………… Ⅴ 英文缩语表………………………………………………………………………………… Ⅶ 前言………………………………………………………………………………………… 1 1 材料……..…………………………………………………………………………. ……… 5 1.1 实验动物...……………………………………………………………………….. ….. 5 1.2 主要实验仪器...……………………………………………………………………….. 5 1.3 主要试剂、耗材………………………………………………...……………………. 6 2 实验方法…..……………………………………………………………………….. …….. 6 2.1CCI 动物模型制备…………..……………………………………….………………… 6 2.2 行为学观察及热板实验………………………………………………….………… 7 2.3 DRG 标本制备…………………….………………………… ………… 7 2.4 全细胞膜片钳记录技术………………………….………………………………… 9 2.5 统计学数据分析…………………………………..………………………………….. 10 结果….…………………………………………………………………………… 11 1. 行为学表现…………………………………………………………………………….. 11 .热板实验结果…….….……………………………………………………………….. 11 .全细胞膜片钳实验结果……………………………………………………………….. 13 讨论…….…………………………………………………………………………………... 22 结论和展望.………………………………………………………………………………... 25 参考文献……….…………………………………………………………………………... 26 文献综述…….……………………………………………………………………………... 31 致谢….……………………………………………………………………………… 39 作者简介…….……………………………………………………………………………... 40 II导师评语…….……………………………………………………………………………... 41 II I I I I 摘要 目的：观察罗哌卡因对 CCI 模型大鼠的 DRG 神经元上 GABA 激活膜电流的影响，探讨罗哌卡 因可能的镇痛机制。 方法：运用全细胞膜片钳技术，分三组记录 CCI 模型鼠手术侧、手术对侧及假手术组急性新鲜 分离 DRG 神经元在预灌流罗哌卡因 30 s 后，比较 GABA 激活膜电流（IGABA）的不同。 结果：( 1 ) 与手术对侧组、假手术组及正常对照组比较，CCI 模型鼠手术侧组的热缩足潜伏期 显著缩短（p0.05）。 ( 2 ) 不同浓度罗哌卡因（0.1-1000 μmol/ L）在大部分（65.7%,48/73）DRG 神经元上可 产生幅值在 0～380 pA 的具有浓度依赖性的内向电流。 ( 3 ) CCI 手术对侧组 DRG 神经元上不同浓度（0.1-1000 μmol/ L）GABA 激活电流幅值显 著大于手术侧组和假手术组（p0.05）。 ( 4 ) 预灌流 10 μmol/ L 的罗哌卡因后 CCI 模型鼠手术侧组 DRG 神经元 GABA（0.1-1000 μmol/ L）激活电流的量效曲线左移，两 EC50 分别为 11.18 μmol/ L 和 16.38 μmol/ L (n=30) 两者之间 无显著性差异( P 0.05)。 ( 5 )分别选取时间点 0（不作预灌流）、10、20、30、40 s 灌流罗哌卡因（10 μmol/ L） 对 GABA（100 μmol/ L）激活膜电流的增强作用随预灌流时间的延长而增加，30