锰过氧化物酶的固态发酵及其对染料脱色作用的研究-环境科学专业毕业论文.docxVIP

中文摘要 中文摘要 安 安徽大学硕士学位论文·李旭东·锰过氧化物酶的固态发酵及其对染料脱色作用的研究 I I PAGE PAGE IV 中文摘要 白腐真菌对多种污染物具有广谱的降解作用，包括多环芳烃、氯酚、染料和 杀虫剂等。固态发酵相比传统的液态发酵产量更高、操作更简单、成本更低。本 实验选择稻壳作为基质进行固态发酵，利用本实验室保存的白腐真菌——裂褶菌 F17（Schizophyllum sp. F17）产锰过氧化物酶（MnP），研究 MnP 酶促脱色染料 的条件，并利用固态发酵反应器建立连续的脱色体系，实验结果如下： 1、采用稻壳作为基质，利用裂褶菌 F17 固态发酵产锰过氧化物酶（MnP）。 通过正交实验对发酵条件进行优化，并对 5 种不同结构类型的染料进行脱色。结 果显示，含水率、温度、Mn2+、Cu2+对裂褶菌 F17 产 MnP 有显著的影响；MnP 发酵的最优化条件为稻壳 27 g，黄豆粉 3 g，MnSO4 0.4 mg/g，含水率 150%，接 种量 50%，培养温度 22℃，pH 自然，优化后酶活达到 16.39 U/g，比优化前的酶 活 9.20 U/g 提高了 78.2%。优化后的发酵体系对染料刚果红、茜素红、Poly R-478、 中性红和结晶紫的 24h 脱色率分别达到 92.6%、90.3%、93.1%、87.3%和 95.6%。 2、MnP 的酶促脱色过程是一个复杂的体系，体系中的 H2O2、Mn2+、染料 和酶的浓度极大地影响脱色效率。通过响应面分析法（RSM）研究这四个因素影 响 MnP 对刚果红脱色的组合效应和交互作用；同时，利用传统的单因子分析法 研究这四个因素的单因子影响。通过单因子分析法，H2O2、Mn2+、刚果红和 MnP 粗酶液的最优化值分别为 0.2 mM、0.5 mM、50 mg/l 和 0.8 ml，而在这个条件下 获得的最佳脱色率为 24.2%。响应面分析通过 Box-Behnken 设计进行，建立了一 个二次多项方程（R2 = 0.8565）用于定量描述四个因素的组合效应和交互作用。 方差分析（ANOVA）表明 H2O2 和 MnP、染料和 MnP 之间的交互作用是显著的； 通过响应面分析获得的最优化条件为 0.35 mM H2O2、0.5 mM Mn2+、75 mg/l 刚果 红和 1.4 ml MnP 粗酶液，最大脱色率为 30.8%。 3、在固态发酵条件下，利用填充床式反应器建立了一个高效的、相对简单 的连续脱色染料刚果红的体系稻壳－裂褶菌 F17。在这个体系中，存在两个脱色 机制，一个是裂褶菌 F17 对染料的脱色作用，另一个是稻壳对染料的吸附作用。 染料浓度和水力停留时间（HRT）对连续脱色影响很大，利用响应面分析法对这 两个因素进行定量分析和最优化。利用 22 的全因子中心复合设计（CCD），实验 建立三个二次回归方程，分别对应于总脱色率（R2 = 0.902）、裂褶菌 F17 对染料 的脱色率（R2 = 0.866）和稻壳对染料的吸附率（R2 = 0.890）。响应等高线图直观 地显示了染料浓度和 HRT 对脱色率的单独影响和累积作用，以及最大的脱色率。 最大的总脱色率为 89.71%，最大的裂褶菌 F17 对染料的脱色率为 60.44%，而获 得这些脱色率的最佳条件分别为染料浓度 142.63 mg/l、HRT 41 h 和染料浓度 110.7 mg/l、HRT 29.4 h。本实验证明了利用白腐真菌在固态发酵反应器中连续脱 色合成染料的可行性。 关键词：裂褶菌 F17；锰过氧化物酶（MnP）；稻壳；固态发酵；脱色；刚果 红；响应面分析；填充床式反应器 英文摘要 英文摘要 安 安徽大学硕士学位论文·李旭东·锰过氧化物酶的固态发酵及其对染料脱色作用的研究 III III PAGE PAGE IV Abstract White-rot fungi possess the ability to degrade a wide variety of pollutants, including polycyclic aromatic hydrocarbon, chlorinated phenols, synthetic dyes and pesticides. Solid-state fermentation has many advantages over conventional liquid culture, such as higher productivity, simpler operation and lower cost. This study carried out solid-state fermentation Selec