微生物的实验室培养 公开课.pptVIP

3个划线平板 1个不划线平板 （重复实验） （空白对照） （3）培养 放入37℃恒温箱中培养12h～24h 2.稀释涂布平板法 ①菌液的梯度稀释： ②涂布平板操作： (1)概念与原理： 聚集的微生物 单个细胞 菌液梯度稀释 菌落 涂布平板 (2)操作： 生长繁殖 ①系列梯度稀释操作 9mL无菌水 9mL无菌水 9mL无菌水 9mL无菌水 9mL无菌水 9mL无菌水 注意：移液管需要经过灭菌；试管口和移液管离火焰1～2cm处。 ②涂布平板操作： 各梯度分别涂布3个平板 1个不涂布作空白对照 稀释103倍 稀释104倍 稀释105倍 放入37℃恒温箱中培养12h～24h （3）培养 1.临时保藏： 试管固体斜面培养基上 4℃ 2.长期保存： 菌种易被污染、变异 甘油管藏 1ml甘油＋1ml菌液 －20℃ 三 菌种的保存 3～6个月，转移培养 2．分析下面培养基的配方：KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、葡萄糖、尿素、琼脂。请回答： (1)在该培养基的配方中，为微生物的生长提供碳源和氮源的分别是________和________。 (2)想一想这种培养基对微生物是否具有选择作用？如果具有，又是如何进行选择的？ ________________________________________________________________________。 有选择作用。因为此配方中尿素是唯一氮源，因此，只有能够利用尿素的微生物才能够生长　 葡萄糖 尿素 3.培养基、培养皿、接种环、实验操作者的双手、空气、牛奶所采用的灭菌、消毒方法依次是 (　　) ① 化学消毒　②灼烧灭菌　③干热灭菌　④紫外线灭菌　⑤高压蒸汽灭菌　⑥巴氏消毒法 A．⑤③②①④⑥　　　　　 B．①②③④⑤⑥ C．⑥②③④①⑤ D．③④②①⑥⑤ A 四 成果评价 如果未接种的培养基在恒温箱中保温1～2d后无菌落生长，说明培养基的制备是成功的，否则需要重新制备。 （二）接种操作是否符合无菌要求 如果培养基上生长的菌落的颜色、形状、大小基本一致，并符合大肠杆菌菌落的特点，则说明接种操作是符合要求的；如果培养基上出现了其他菌落，则说明接种过程中，无菌操作还未达到要求。 （一）培养基的制作是否合格 （三）是否进行了及时细致的观察与记录 培养12h与24h后的大肠杆菌菌落的大小会有明显不同，及时观察记录的同学会发现这一点，并能观察到其他一些细微的变化。 液体培养基：工业生产 表面生长 均匀混浊生长 沉淀生长 固体培养基用途：用于微生物纯化、计数、鉴定 半固体培养基：观察运动 专题2 微生物的培养与应用 课题1 微生物的实验室培养 了解有关培养基的基础知识，进行无菌技术的操作，进行微生物的培养。 一、课题目标： 掌握培养基的制备、高压蒸气灭菌和平板划线法等基本操作技术，熟练、规范地进行无菌操作，成功地培养微生物。 无菌技术、平板划线法等基本操作 二、课题重点和难点： 三、技能目标： 一.微生物的类群 微生物 原核类: 真核类 非细胞类： 细菌、支原体、放线菌、蓝藻 个体微小、结构简单 酵母菌、霉菌、食用菌 真菌： 原生生物： 显微藻类、原生动物（如：草履虫、变形虫等） 病毒 ◆微生物的共同特点： 1.细菌的形态 2.细菌的菌落 ⑴.定义： 单个或者少数细菌在固体培养基上大量繁殖时，会形成一个肉眼可见的、具有一定形态结构的子细胞群体，叫做菌落。 ⑵.特征： 大小、形状、光泽度、颜色、硬度、透明度等。 ⑶.功能： 每种细菌在一定条件下所形成的菌落，可以作为菌种鉴定的重要依据。 几种菌落及其形态 1.概念： 人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。 二.培养基 思考：微生物要生存繁殖，需要“吃”什么？ 2.培养基的营养物质 1.水 2.碳源（提供碳元素的物质） 3.氮源（提供氮元素的物质） 4.无机物（无机盐） 3.培养基的类型 （1）按物理状态分：固体培养基 半固体培养基 液体培养基 区别：加入琼脂的量决定培养基的物理状态。 注意：一般细菌不能利用琼脂。 单个或者少数微生物在固体培养基表面生长繁殖,可以形成肉眼可见子细胞的群体——菌落 固体培养基用途：用于微生物纯化、计数、鉴定 液体培养基：工业生产 表面生长 均匀混浊生长 沉淀生长 半固体培养基：观察运动 天然培养基 合成培养基 化学成分不恒定的天然有机物 如：牛肉膏蛋白胨培养基、马铃薯培养基 化学成分完全了解的物质配制而成的培养基 （2）按化学成分划分： 鉴别培养基 将某种类微生物从混杂的微生物群体中分离出来 用于鉴别不同类型微生物的培养基 选择培养基