课件：生物化学复习分解.pptVIP

离子交换柱层析（ion-exchange column chromatography） 磺酸型阳离子交换树脂 树脂先用含Na的缓冲液处理成钠盐，且pH在2左右，将氨基酸混合液（pH2-3）上柱，氨基酸此时是阳离子，与树脂上的钠离子交换，被固定在树脂上。 作用力：（1）静电吸引，（2）氨基酸侧链与树脂基质(聚苯乙烯)的疏水作用力 用氨基酸自动分析仪分析氨基酸混合物的洗脱曲线（阳离子交换剂）。 洗脱的先后顺序取决于氨基酸的所带电荷与离子交换树脂的静电吸引和疏水相互作用两者的综合作用的结果。 1. 用强酸型阳离子交换树脂分离下述氨基酸,当用pH7.0 的缓冲溶液洗脱时,下述每对中先从柱上洗脱下来的是哪种氨基酸?(1) 天冬氨酸和赖氨酸; (2)精氨酸和甲硫氨酸; (3) 谷氨酸和缬氨酸 (4)甘氨酸和亮氨酸; (5)丝氨酸和丙氨酸 解析与要点: 用离子交换树脂分离氨基酸主要根据氨基酸所带电荷不同, 另外还和氨基酸的极性有关. 2. Lys, Arg, Asp, Glu, Thr和Ala 的混合物在高pH值时，加到阴离子交换树脂上，用连续递减的 pH值溶液洗脱时，预测这些氨基酸的洗脱顺序 解答：这些氨基酸的pI 分别是：Arg 10.76， Lys 9.74, Thr 6.53, Ala 6.0, Glu 3.22, Asp 2.97。在高pH值时均带负电荷，与