不同消毒方法对同种异体半月板移植效果的研究.doc

解放军医学院硕士学位论文 2 万方数据 解放军医学院硕士学位论文 题目：不同消毒方法对同种异体半月板移植效果的研究 中文摘要 相关研究指出，半月板具有缓冲应力、吸收震荡、增大关节接触面积降低局 部应力、稳定并润滑关节、营养关节软骨等作用，在维持膝关节功能方面至关重 要。Arnoczky 等于 1982 年提出了半月板血供三区分类法，其中的白区损伤将致使 受损区域丧失修复能力。而半月板损伤或切除后关节软骨损害继而出现关节炎可 能与胫骨关节面应力的改变有关，Seedholm BB 和 Walker PS 等研究表明，内侧半 月板承受内侧间室 50%的应力，外侧半月板承受外侧间室 70%的应力，即使半月 板切除 20%也可使关节软骨承受的应力增加 350%。此外，Fairbanks 等最早指出， 半月板损伤或缺失会产生关节面的磨损、关节软骨增生等一系列表现，进而导致 或促进骨关节炎的发生发展，并得到了相关研究的证实。迄今为止，同种异体半 月板移植是半月板损伤非常有前景的治疗方法，且国内外有同种异体半月板移植 以纠正胫股关节面应力的报道，相关的基础和临床研究逐渐发展完善。但就同种 异体半月板移植而言，其来源在伦理和法律方面受到很大限制，尤其是现有的消 毒方法和贮存工艺尚不能满足临床需要，且国内外的相关报道较少，现利用家兔 模型就不同消毒方法对同种异体半月板移植效果进行实验研究，为相关基础研究 和临床应用以及同种异体半月板移植的标准化和规范化提供参考。 目的 比较不同消毒方法对家兔膝关节半月板的消毒效果；观察不同消毒方法对同种 异体半月板移植效果的影响并寻找出适宜的消毒方法指导相关临床应用。 方法 选取 22 只新西兰大白兔（2.5±0.5Kg），用 50ml 注射器经耳缘静脉注入 20ml 空气，待兔子死亡后在局部无菌条件下摘取所需的双侧膝关节内外侧半月板 85 个， 将所摘取的半月板随机分为五组并立即对所有半月板标本种植金黄色葡萄球菌 （SA）：碘伏组、钴 60 组、戊二醛组、环氧乙烷组、生理盐水组（对照组），金黄 色葡萄球菌种植完毕分别从每组随机抽取 7 个标本进行细菌定量检测，其余标本 3 万方数据 解放军医学院硕士学位论文 分别用钴 60 组辐照、戊二醛浸泡、环氧乙烷熏蒸、碘伏浸泡、生理盐水浸泡等方 法进行消毒灭菌。消毒完成再从各组随机抽取 7 个标本再次进行细菌定量检测， 并记录各组标本消毒前后的细菌数量，余下 3 个标本在消毒完成后立即用 10%的 甲醛固定液固定，然后进行组织学观察，数据收集完毕进行统计学分析。 另选取 13 只新西兰大白兔（2.5±0.5Kg）用 50ml 注射器经耳缘静脉注入 20ml 空气栓塞致死后摘取所需半月板标本 50 个立即在-40°条件下深冻 1 个月。半月板 标本深冻完毕随机分为五组：碘伏组、钴 60 组、戊二醛组、环氧乙烷组、生理盐 水组（对照组），分别对各组标本进行消毒以备移植。选取日本大耳兔 50 只 （2.5±0.5Kg）随机编入供移植的各组半月板标本内：碘伏组、钴 60 组、戊二醛组、 环氧乙烷组、生理盐水组（对照组），将已消毒好的新西兰大白兔半月板分别逐一 移植到日本大耳兔右下肢膝关节内，6 周后分别取出各组标本，每组随机选取 7 个 标本进行生物力学检测，其余 3 个标本用 10%的甲醛固定液固定进行组织学观察。 结果 细菌定量检测结果显示，五个分组中的 85 个半月板标本接种 SA 48 小时后均 种植成功，标本上的 SA 数量平均从 5.26x102/个到 6.29x102/个不等；其中碘伏组 最多，钴 60 组细菌数量最少，统计结果提示各组间差异无统计学意义（P0.05）。 采用五种不同的消毒方法处理后的结果显示，钴 60 组、戊二醛组、碘伏组、环氧 乙烷组半月板标本的 SA 计数数量均数均1/个，氯化钠组 SA 均数为 415/个。钴 60 组、环氧乙烷组、戊二醛组、碘伏组灭菌率均为 100%，氯化钠组灭菌率仅为 %。病理检查结果提示：各组标本的组织结构中均有大量的细胞核，碘伏组 结构保存最为完整；钴 60 组和戊二醛组结构保存较为完整，排列相对规则整齐， 广泛分布有较小的孔隙；氯化钠组结构破坏较为严重，排列较迂曲，广泛分布有 大量的较大的孔隙；环氧乙烷组结构破坏最为严重，结构迂曲，排列紊乱不规则， 广泛分布有大量的大孔隙或有组织缺损。 五种不同消毒方法处理后的同种异体半月板移植 6 周后的生物力学检测结果 （压力负荷）提示，碘伏组半月板标本能够承受的压力最大，平均为 270N，环氧 4 万方数据 解放军医学院硕士学位论文 乙烷能够承受的压力最小，平均为为 40N。统计结果提示，碘伏组、钴 60 组、戊 二醛组、氯化钠组标本承受的平均压力均大于环氧乙烷组且差异有统计学