连香树体细胞胚胎发生及植株再生体系的研究-风景园林学专业毕业论文.docxVIP

广西大学学位论文原创性和使用授权声明本人声明所呈交的论文，是本人在导师的指导下独立进行研究所取得 广西大学学位论文原创性和使用授权声明 本人声明所呈交的论文，是本人在导师的指导下独立进行研究所取得 的研究成果。除己特别加以标注和致谢的地方外，论文不包含任何其他个 人或集体已经发表或撰写的研究成果，也不包含本人或他人为获得广西大 学或其它单位的学位而使用过的材料。与我一同工作的同事对本论文的研 究工作所做的贡献均己在论文中作了明确说明。 本人在导师指导下所完成的学位论文及相关的职务作品，知识产权归 属广西大学。本人授权广西大学拥有学位论文的部分使用权，即：学校有 权保存并向国家有关部门或机构送交学位论文的复印件和电子版，允许论 文被查阅和借阅，可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行 检索和传播，可以采用影印、缩印或其它复制手段保存、汇编学位论文。 本学位论文属于： 口保密，在 年解密后适用授权。 日不保密。 (请在以上相应方框内打“√”) 论文作者签名： 争，舡穸 B朔：训6．f|寡 指导教师签名： 冬莰铝 日觏矽臣f f岳 作者联系电话： 1 5296576373 电子邮箱：409520480@qq．com 万方数据 连香树体细胞胚胎发生及植株再生体系的研究摘要 连香树体细胞胚胎发生及植株再生体系的研究 摘要 连香树(Cerdiphyllumjaponicum Sieb．)是连香树科连香树属的稀有种植物，是国家二 级重点保护植物，集药用、材用和观赏等功能于一体，具有广阔的利用前景。然而，其 雌雄异株，结实率低，种子较小，天然更新能力较差，现存树种资源十分稀少，常规的 繁育方法，难以实现其种群的扩繁、保护和合理利用，因此，本研究以连香树授粉120d 的种子为外植体，研究不同种类和浓度的植物生长调节剂、不同的外植体类型、不同的 添加物等多种因素对连香树体细胞胚胎发生的影响，以期建立稳定的连香树体细胞胚胎 发生的培养体系；同时，通过对连香树胚性与非胚性愈伤组织同工酶酶谱的分析，初步 探讨连香树体细胞胚胎发生形态建成的机理，研究结果如下： 1、以连香树授粉120 d后未成熟种子子叶胚为外植体接种到不同植物生长调节剂组 合的培养基上诱导愈伤组织，在添加不同浓度的2，4．D和KT的MS培养基上，愈伤诱 导率最高达到73．33％，但在后期的增殖培养中愈伤组织不能转化成为胚性愈伤组织； 在添加不同浓度的6-BA、NAA和KT的MS培养基上，愈伤组织也未能在后期培养中 转化成为胚性愈伤组织；培养基MS+O．5 mg／L 2,4．D+2．0 mg／L 6-BA+0．5 g／L AC是诱 导愈伤组织的最佳培养基，并且在此培养基中能观察到有直接体胚发生的现象，在后期 的增殖培养基MS+O．1 mg／L 2,4一D+0．1 mg／L 6-BA+O．5 g／L AC中愈伤组织能转化成为 胚性愈伤组织。 2、以连香树授粉120 d后未成熟种子子叶胚和授粉150 d后成熟种子萌发出来的幼 苗，切取子叶面积大小为O．3 cm2、胚轴长度为O．5 cm和胚根长度为0．5 cm作为4种外 植体诱导愈伤组织，结果表明未成熟种子子叶胚是诱导体细胞胚胎发生最适合的外植 体。 3、连香树体细胞胚胎发生最适合的诱导培养基为MS+O．5 mg／L 6-BA+1．0 mg／L NAA+1．0 g／LAC，体胚的诱导率为30％；体胚增殖最适合的的培养基为MS+O．1 mg／L 6-BA+0．1 mg／LNAA+O．5 g／LAC，PH为6．0，琼脂浓度为0．7％～O．75％；体胚苗最适合 万方数据 的生根培养基为MS+1．0 的生根培养基为MS+1．0 mg／L IBA。 4、用非变形聚丙烯酰氨凝胶电泳技术(PAGE)对连香树胚性和非胚性愈伤组织的 过氧化物酶(POD)、超氧化物歧化酶(SOD)和淀粉酶(AMY)同工酶酶谱的分析 表明：POD、SOD和AMY酶等同工酶活性与胚性愈伤组织的诱导密切相关，酶谱的差 异可作为体细胞胚胎发生的参考标记。 关键词：连香树；体细胞胚胎发生；植株再生；同工酶 II 万方数据 The The study of somatic embrygenesis of regeneration in Cerdiphyllum japonicum Sieb． Abstract Cerdiphyllumjaponicum Sieb．belongs to Cercidiphy‘llaceae family，rare and endangered species．The plant is isolation and dioecious．CerdiphyHum japonicum Sieb．has high medicinal，timber and o