移植前不同胚胎筛选方法有效性比较的系统评价.doc

新疆医科大学硕士学位论文 前 言 人类辅助生殖技术(Assisted Reproduction Techniques,ART)是指采用医疗辅助手 段通过在体内外对胚胎及配子进行操作使不孕不育夫妇妊娠的技术，是现阶段解决 不孕不育症最有效的方法[1]。它主要包括人工授精(Artificial Insemination,AI)、配子 移植(Gametes Transfer,GT)和体外受精-胚胎移植(In Vitro Fertilization and Embryo Transfer,IVF-ET)及其衍生技术。自第一例试管婴儿 Louise Brown 于 1978 年 7 月 25 日在英国诞生之后，该技术就被广泛的应用于不孕症领域。然而，当前的辅助生殖 技术治疗获得的多胎妊娠率高达 25%以上，严重超过自然周期的多胎妊娠率高达几 十倍，从而使妊娠并发症的发生率及新生儿的患病率大大增加[2]。所以人类辅助生殖 技术的最终目的是让每一对不孕不育夫妇获得一个健康的孩子[3]。2012 年欧洲人类 生殖与胚胎协会（ERHRE）也对 ART 治疗效果的衡量标准提出了明确的定义：即单 个健康儿的出生。故多胎妊娠被认为是 ART 应当避免的并发症之一而不是成功的助 孕结果，多胎妊娠不仅使孕产妇及新生儿并发症的风险提高，而且使社会成本及家 庭经济负担增加。 但因为我国规定，年龄=35 岁的妇女每周期移植胚胎总数不得超过 3 个，35 岁的妇女第一个周期（新鲜周期）移植胚胎数不得超过 2 个，而在冻融周期通常不 是第一个助孕周期，尽管年龄35 岁，但可移植 3 个胚胎[4]。这说明，不仅新鲜周期 易发生多胎妊娠的结局，而且为了获得一定的临床妊娠率和活产率，冻融周期移植 的胚胎数目要比新鲜周期更多，更易发生多胎妊娠的结局。这也成为多胎妊娠的重 要原因之一。故本系统评价共纳入 4 项研究[5-8]，其中就包括两项[5,6]胚胎筛选方法用 于冻融胚胎移植前的有效性的研究。但在冻融周期中能够实现单胚胎移植的前提条 件是有良好、稳定的胚胎冷冻技术。传统程序化冷冻法无法避免冰晶的形成及胚胎 的损伤，使其复苏率和妊娠率不稳定，而玻璃化冷冻法是一种简单、快速、经济的 冷冻技术可以避免以上缺点，且能够获得较好的临床效果[9]。所以单胚胎移植无论用 于新鲜周期或是玻璃化冷冻后胚胎移植周期都是非常必要的和亟待解决的问题。但 又因为非选择性施行单胚胎移植技术（SET）常导致临床低妊娠率及低活产率[10]， 故选择性的单胚胎移植技术（ESET）日益受到关注。 那么如何提高胚胎筛选方法，准确选择遗传学正常、发育潜能好的胚胎已成为 现阶段的重点研究方向。而目前评估胚胎质量主要依靠形态学评估方法，包括卵母 细胞、原核期、卵裂期和囊胚期评分，其他胚胎筛选方法如定向代谢分析法（包括 NIR 法）及基因组学分析法（包括 CCS 法）在临床上的应用均在研究中，但或许能 为单胚胎移植带来新的转机。故我们通过对传统形态学评估方法与 NIR 法或 CCS 法 3 万方数据 新疆医科大学硕士学位论文 的几项随机对照试验进行系统评价，旨在比较这些方法的有效性，以指导临床应用。 4 万方数据 新疆医科大学硕士学位论文 研究内容与方法 1 资料收集 纳入与排除标准 研究类型 所有比较通过形态学方法筛选胚胎与其他方法（包括 NIR 法、CCS 法等）筛选 胚胎在新鲜胚胎或玻璃化冷冻后胚胎移植患者的随机对照试验，不论是否采用盲法。 语种限制为中文及英文。 研究对象 均为需要进行胚胎移植的不孕症患者（即是指育龄期夫妇，未采用任何避孕措 施，有正常性生活，同居一年而未能妊娠的一种低生育状态者采用其他药物及人工 授精等方式仍未孕，需要进行体外受精-胚胎移植及其衍生技术），排除特殊人群即反 复种植失败、反复流产及高龄产妇的患者，其种族、国籍、病程不限。 干预措施 试验组采用形态学方法（ 是目前应用最广泛的胚胎质量评价方法，即在取卵后 第 2-3 天将被随机选择的患者的胚胎进行形态学的观察，卵裂期胚胎（以胚胎发育速 度、卵裂球的数目、形态及有无核碎片等情况进行评分），对发育潜能可的胚胎进行 单胚胎移植，其他剩余胚胎或冷冻或丢弃或养囊，即在第 3 天将胚胎转入“囊胚培 养液”中进行培养，第 5-6 天进行囊胚观察（以囊胚的扩张及孵化程度、内细胞团的 形态、滋养层细胞的数目和大小等进行评分），后将发育潜能可的胚胎进行单胚胎移 植，其他剩余胚胎或冷冻或丢弃）, 对照组采用 NIR 法（是一种对胚胎调节过程中 的代谢产物进行分析的方法，即从被随机选择的胚胎的培养基中吸取小等份（13 毫 升）的介质液滴注入特定的采样盒中由（原型分析近红外光谱系统）分析仪进行分 析后，通过两种不同的方法对培养基样品进行计算，将最