硫酸卡那霉素慢性致聋豚鼠耳蜗细胞变性及蜗神经背核神经元和突触可塑性的时序性和机制研究-耳鼻咽喉科学专业毕业论文.docxVIP

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2019-05-18 发布于上海
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硫酸卡那霉素慢性致聋豚鼠耳蜗细胞变性及蜗神经背核神经元和突触可塑性的时序性和机制研究-耳鼻咽喉科学专业毕业论文.docx

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华中科技大学博士学位论文华中科技大学博士学位论文 PAGE 10 PAGE 10 局部的 IGF-1 可能通过抑制神经元凋亡和促进突触的重排参与了神经元和突触重塑过程。关键词: 硫酸卡那霉素；胰岛素样生长因子-1；超微结构；突触；梭形细胞第三部分兴奋性和抑制性递质受体在硫酸卡那霉素慢性致聋豚鼠蜗神经背核突触重塑中作用研究目的：探讨兴奋性和抑制性递质受体在硫酸卡那霉素慢性致聋豚鼠蜗神经背核突触重塑中的作用。方法：耳廓反射正常，听力正常的成年白色红目豚鼠为研究对象，大腿内侧皮下每天注射硫酸卡那霉素 500mg/kg，连续注射 7 天。注药后第 1 天、7 天、 14 天、28 天、56 天、70 天和 140 天，采用免疫组化技术研究成年豚鼠蜗神经背核突触素表达变化的情况，同时应用实时荧光定量 PCR 技术定量分析蜗神经背核 N-甲基 -D-天冬氨酸型受体 1（NR1）和γ-氨基丁酸型受体 A 型α1 亚单位(GABRA1) mRNA 表达变化情况。结果：1、蜗神经背核突触素的表达有两种形式。一种斑点状均匀分布在神经纤维网上，另一种分布在细胞体周围。在蜗神经背核, 第二种形式的分布较常见。2、除 70 天和 140 天组外，其余实验组的突触输入数量均有不同程度的增加 (与对照组比较, P0.05)。突触素平均灰度(突触素表达量)，1 天、7 天、28 天、56 天实验组表达增加 (与对照组比较, P0.001)。突触素免疫染色面积（突触末端占据的面积），只有 7 天 14 天组有显著的下降 (与对照组比较, P≤0.01)。3、正常组及注药后 1、7、14、28、56、70 和 140 天蜗神经背核内 NR1 mRNA 扩增倍数分别为 1、1.58 ± 0.18、 2.20 ± 0.33、 3.67 ±0.34、 2.04 ± 0.30、1.34 ± 0.36、 1.28 ± 0.21 和 1.29 ± 0.17。与对照组比较，第 1、7、14和 28 天，NR1 mRNA 表达上调（P0.001)。 4、正常组及注药后 1、7、14、28、56、70 和 140 天蜗神经背核内 GABRA1 mRNA 扩增倍数分别为 1、0.77 ± 0.08、 0.45 ± 0.09、 0.34 ±0.07、 0.32 ± 0.07、 0.90 ± 0.11、 0.94 ± 0.12 和 0.92 ± 0.11，与对照组比较，第 1、7、14 和 28 天，GABRA1 mRNA 表达下调（P 0.001)。结论：1、硫酸卡那霉素对蜗神经背核内突触数量以及兴奋性和抑制性递质受体的分布的影响是逐渐累积的。2、硫酸卡那霉素慢性致聋后，蜗神经背核内兴奋性和抑制性递质受体出现重排。3、在硫酸卡那霉素所致进行性不完全去传入和神经元损伤后，兴奋性谷氨酸能突触通路的活性增强，抑制性 GABA 能突触通路活性减弱。4、兴奋性和抑制性递质受体重排可能在硫酸卡那霉素慢性致聋后突触重塑中发挥了重要作用。关键词: 硫酸卡那霉素；突触素；受体；抑制；兴奋 Study on Time Course of Cochlear Cell Degeneration and Dorsal Cochlear Nucleus Plasticity of Guinea Pig Following Chronic Kanamycin-induced Deafness Doctor candidate: Ze-deng Yin Supervisor: Prof. Wei-jia Kong Department of Otolaryngology, Union Hospital of Tongji Medical College, Huangzhong University of Science and Technology Abstract Part Ⅰ Study on time sequence and mechanism of auditory nerve and spiral ganglion cell degeneration following chronic kanamycin-induced deafness in the guinea pig Objective: To construct a chronic kanamycin-induced deafness model, investigate the time sequence and mechanism of auditory nerve and spiral ganglion cell degeneration guinea pig fol